DHX9通过招募HDAC5表观沉默BECN1抑制自噬促进乳腺癌进展的机制研究

　　本研究针对乳腺癌中自噬异常与肿瘤进展的关联机制，揭示了RNA解旋酶DHX9通过招募组蛋白去乙酰化酶HDAC5至BECN1启动子区，介导组蛋白H3去乙酰化从而抑制自噬关键基因转录的新通路。该发现为乳腺癌治疗提供了DHX9-HDAC5-BECN1轴这一潜在靶点，发表于《Cell Death and Disease》。

　　

乳腺癌作为女性发病率最高的恶性肿瘤，其分子机制和治疗靶点的探索一直是研究热点。自噬（autophagy）作为细胞重要的代谢过程，与肿瘤发生发展的关系呈现"双刃剑"特征——既可抑制早期肿瘤形成，又能促进晚期肿瘤存活。BECN1（Beclin1）作为首个被鉴定的哺乳动物自噬相关基因（ATG），在乳腺癌中呈现单等位基因缺失，但具体调控机制尚未完全阐明。与此同时，DExD/H-box解旋酶家族成员DHX9（RNA helicase A）在多种癌症中异常高表达，但其是否通过调控自噬影响乳腺癌进展仍属未知。

南方医科大学南方医院乳腺外科的研究团队通过整合TCGA和GEO数据库分析，结合体外实验和动物模型，首次揭示了DHX9通过表观遗传机制抑制BECN1表达、阻断自噬流（autophagic flux）并促进乳腺癌进展的分子通路。该研究发表于《Cell Death and Disease》2025年第16卷。

研究人员运用生物信息学筛选、免疫共沉淀（Co-IP）、染色质免疫沉淀（ChIP）、双荧光素酶报告基因等技术，结合临床样本分析和裸鼠移植瘤模型，系统阐明了DHX9的致癌机制。关键实验包括：TCGA和GEO数据库挖掘DHX9表达谱；构建DHX9敲低/过表达细胞模型；通过CCK-8、EdU掺入、Transwell实验评估细胞增殖和转移能力；采用GFP-LC3/mRFP-GFP-LC3标记自噬体形成；利用组织芯片（TMA）进行免疫组化验证。

DHX9在乳腺癌中高表达且预示不良预后
通过分析TCGA-BRCA和GSE162228数据集，发现DHX9在乳腺癌组织中的mRNA和蛋白水平显著高于癌旁组织（图1C,I,K）。生存分析显示高表达DHX9的管腔型乳腺癌患者总生存期更短（图1D），临床样本Western blot和免疫组化验证了这一现象（图1I-K）。

DHX9促进肿瘤恶性表型
体外实验表明，DHX9敲低显著抑制MCF7（Luminal A）和MDA-MB-231（TNBC）细胞的增殖（CCK-8和EdU实验，图2A,C）、克隆形成（图2B）及迁移侵袭能力（Transwell实验，图2D）。裸鼠移植瘤模型证实DHX9敲除可减小肿瘤体积/重量（图2E-G），延长生存期（图2H），并降低Ki-67表达（图2I）。

DHX9通过抑制自噬促进肿瘤进展
GSEA分析提示DHX9与mTOR通路相关（图S3A）。实验证实DHX9过表达激活mTOR信号（p-mTOR^Ser2448上调，图S3B），而敲低DHX9增加LC3-II积累（图3A）和自噬体形成（图3D-E）。值得注意的是，即使在mTOR抑制剂雷帕霉素存在时，DHX9仍能调控自噬（图3C），表明其作用不完全依赖mTOR。

BECN1是DHX9的关键效应分子
在筛选的ATG中，BECN1对DHX9敲低最敏感（mRNA增加5.8倍，图4A）。挽救实验证明BECN1敲除可逆转DHX9沉默诱导的自噬增强（LC3-II下降，图4E）和肿瘤抑制效应（恢复细胞增殖/迁移，图4G-I）。

DHX9-HDAC5共定位抑制BECN1转录
双荧光素酶报告基因和ChIP-PCR证实DHX9结合BECN1启动子区（-500至+1 bp，图5B-D）。机制上，DHX9招募HDAC5（图6C）至BECN1启动子（Re-ChIP验证，图6H），介导组蛋白H3去乙酰化（Ace-H3减少，图7B-C），而HDAC抑制剂可逆转这种抑制（图5F-J）。

这项研究首次阐明DHX9通过"DHX9-HDAC5-BECN1"轴表观沉默自噬关键基因的分子机制，为乳腺癌治疗提供了新靶点。临床转化方面，研究发现DHX9抑制剂可增强氯喹（CQ）的抗肿瘤效果（图S7G-K），提示联合治疗潜力。鉴于HDAC抑制剂（如Entinostat）已在临床试验中显示对三阴性乳腺癌的疗效，该研究为开发针对DHX9-HDAC5通路的精准疗法奠定了理论基础。