辣木叶银纳米颗粒通过调控pAKT/NF-κB通路诱导宫颈癌细胞凋亡的机制研究

　　这篇研究创新性地将辣木叶提取物与银纳米颗粒（AgNPs）结合，通过抑制磷酸化Akt（p-Akt）和核因子κB（NF-κB）信号通路，显著诱导HeLa宫颈癌细胞凋亡（p<0.05）。研究证实MOLP-AgNPs具有57.4nm的均匀粒径和-37.3mV的高稳定性，其通过剂量依赖性方式降低癌细胞活力，在6μg/mL时效果媲美化疗药物顺铂，为开发低毒性宫颈癌靶向疗法提供了新思路。

　　

【ABSTRACT】

宫颈癌作为全球女性第二大常见恶性肿瘤，其发病与HPV16/18型感染导致的PI3K/Akt和NF-κB信号通路异常激活密切相关。传统疗法存在严重副作用，促使研究者转向开发植物源纳米药物。本研究创新性地将富含酚类化合物的辣木叶（Moringa oleifera）提取物与银纳米颗粒（AgNPs）结合，证实MOLP-AgNPs能通过显著抑制NF-κB和p-Akt蛋白表达（p<0.05）诱导HeLa细胞凋亡，展现出优于传统疗法的稳定性和低毒性。

【1. Introduction】

宫颈癌每年导致全球34.2万女性死亡，其典型特征是通过持续激活NF-κB通路抵抗凋亡，并依赖PI3K/Akt通路促进细胞存活。辣木叶中鉴定出的槲皮素、棕榈油酸等活性成分，已被证实可通过激活Caspase-3级联反应诱导肺癌细胞凋亡。而AgNPs凭借其独特的小尺寸效应（1-100nm）和产生ROS的能力，成为理想的药物递送载体。本研究首次系统评估了MOLP-AgNPs对宫颈癌细胞双重通路调控机制。

【2. Experimental】

实验采用ATCC来源的HeLa细胞系，在含10%FBS的DMEM培养基中培养。辣木叶粉末（MOLP）经水提后与1mM AgNO₃反应生成纳米颗粒，通过GC-MS和LC-HRMS鉴定出酮类（34.8%）和棕榈油酸（7.85%）等主要活性成分。采用粒径分析仪、TEM和紫外光谱对纳米颗粒进行表征，并通过流式细胞术（Annexin V/PI染色）和免疫荧光法检测凋亡及通路蛋白表达。

【3. Results and discussion】

3.1 MOLP表征

GC-MS分析显示丙酮提取物中酮类占比最高，LC-HRMS进一步鉴定出12-氧代植物二烯酸等抗癌活性成分。这些化合物通过线粒体途径激活Caspase-3，为后续纳米颗粒制备奠定物质基础。

3.2 MOLP-AgNPs特性

• 粒径分析：纳米颗粒平均直径57.4nm（PDI=0.425），符合纳米材料标准

• TEM观察：呈现规则球形结构，有利于组织穿透

• Zeta电位：-37.3mV表明胶体稳定性极佳

• UV-Vis：476nm处特征吸收峰证实表面等离子共振效应

3.3 抗癌效应

剂量实验显示：

• •

  2μg/mL组：细胞活力轻微下降（p>0.05）

• •

  6μg/mL组：抑制效果与顺铂相当（p<0.01）

  值得注意的是，4μg/mL剂量对NF-κB抑制最显著（p<0.05），而p-Akt抑制效果不显著，提示可能存在通路交叉调控。

3.4 机制解析

• 凋亡诱导：通过下调Bcl-2家族蛋白，激活Caspase级联反应

• 通路抑制：阻断TNFα-TNFR1-NF-κB信号轴，减少COX-2等促炎因子产生

• 独特现象：6μg/mL时凋亡率反降，可能与高浓度引发坏死性死亡有关

【4. Conclusion】

本研究证实MOLP-AgNPs通过多靶点作用：

1）物理特性：57.4nm球形结构配合负电表面增强肿瘤渗透

2）分子机制：协同抑制NF-κB和PI3K/Akt两条关键致癌通路

3）治疗优势：剂量依赖性凋亡诱导且毒性低于传统化疗

未来研究需进一步优化给药方案，并探索其与放疗的联合应用潜力。