靶向YAP蛋白克服胃肠道间质瘤伊马替尼耐药性：药物耐受持久性细胞的新治疗策略

　　本研究针对胃肠道间质瘤(GIST)伊马替尼(imatinib)治疗后高复发率的临床难题，揭示了药物耐受持久性细胞(DTPs)通过yes-associated protein(YAP)介导的生存机制。研究人员通过体外实验和动物模型证实，YAP抑制剂维替泊芬(verteporfin)可有效抑制DTPs的YAP核转位，联合伊马替尼显著延缓肿瘤再生。该发现为克服GIST靶向治疗耐药提供了新思路，具有重要转化医学价值。

　　

胃肠道间质瘤(GIST)作为最常见的消化道间叶源性肿瘤，其治疗曾长期面临困境。直到靶向药物伊马替尼(imatinib)的出现，这种特异性抑制KIT和PDGFRA的酪氨酸激酶抑制剂(TKI)才为晚期患者带来曙光。然而临床数据显示，即使获得长达30个月的无进展生存，停药后的高复发率仍如达摩克利斯之剑高悬——这暗示着肿瘤细胞可能通过某种"休眠"机制逃避药物杀伤。近年来，药物耐受持久性细胞(DTPs)的概念为解释这一现象提供了新视角：这类细胞不依赖基因突变，而是通过可逆的表观调控暂时耐受治疗压力，成为获得性耐药的"前哨兵"。

日本大阪大学Takashi Yokouchi团队在《Gastric Cancer》发表的研究，首次系统揭示了YAP在GIST耐药中的关键作用。研究人员采用伊马替尼敏感型GIST-T1细胞系构建DTPs模型，通过Western blot、核质分离和免疫荧光证实YAP核转位增加；临床样本分析显示术前接受伊马替尼治疗的患者肿瘤中YAP阳性细胞比例显著升高。机制研究发现，YAP抑制剂维替泊芬可特异性诱导DTPs凋亡，联合伊马替尼使肿瘤再生延迟3周以上。动物实验进一步验证，该组合疗法较单药显著抑制肿瘤再生，且未增加毒性。这些发现不仅阐明了GIST耐药的动态调控机制，更为临床克服耐药提供了可快速转化的治疗策略。

研究主要采用以下关键技术：1) 使用1μM伊马替尼处理GIST-T1细胞≥9天建立DTPs模型；2) 通过核质分离和免疫荧光分析YAP亚细胞定位；3) 采用WST-8法和Caspase 3/7活性检测评估药物敏感性；4) 建立BALB/cAJcl-nu/nu小鼠异种移植模型验证疗效；5) 分析31例临床样本（19例未治疗，12例术前伊马替尼治疗）的YAP表达特征。

Reversible nuclear localization of YAP in GIST DTPs

研究发现伊马替尼处理的DTPs呈现典型G₁期阻滞，核内YAP水平较亲代细胞增加2.1倍。有趣的是，这种改变在撤药1周后完全逆转，证实其非遗传特性。临床数据呼应了这一发现：术前伊马替尼组YAP阳性细胞比例达42.3%，显著高于未治疗组(11.7%)和耐药组(15.4%)。

YAP inhibitors reduced nuclear localization of YAP in DTPs

维替泊芬和XAV-939均能有效抑制YAP核转位，但作用机制不同：前者直接阻断YAP-TEAD相互作用，后者通过稳定AMOT蛋白激活LATS激酶促进YAP磷酸化。DTPs对YAP抑制剂的敏感性显著高于亲代细胞(IC₅₀降低57%)， caspase 3/7活性提升3.8倍。

Effect of combination therapies with imatinib and YAP inhibitors on DTPs

联合治疗展现出独特优势：12天给药后观察3周，维替泊芬组细胞增殖抑制率维持82%，显著优于单药组。流式分析显示联合治疗使DTPs持续停滞在G₁期， Annexin V检测证实凋亡率提升至41.3%，而单用伊马替尼仅6.2%。

Antitumor effects of the combination therapy in xenograft models

动物实验显示，伊马替尼(100mg/kg)联合维替泊芬(10mg/kg)使肿瘤再生延迟15天，且不加重体重下降。免疫组化证实治疗组YAP阳性细胞减少62%，TUNEL染色显示坏死区周边凋亡细胞密度增加3.4倍。

这项研究首次系统阐明YAP动态调控是GIST获得药物耐受的关键机制。临床前数据表明，短期联合YAP抑制剂可有效清除DTPs库，其意义在于：1) 为解释靶向治疗后的肿瘤复发提供新理论框架；2) 维替泊芬作为已获批的眼科用药，安全性明确，具备快速转化潜力；3) 提出的"脉冲式联合策略"——在维持TKI基础上短期加用YAP抑制剂，既可增强疗效又避免长期毒性。值得注意的是，研究也发现不同YAP抑制剂作用机制的差异，提示未来需优化抑制剂选择。虽然样本量限制和缺乏基因编辑验证构成研究局限，但这项工作无疑为攻克GIST耐药难题开辟了新路径，其揭示的YAP介导的可塑性耐药机制也可能适用于其他肿瘤类型。