昼夜节律相关miR-6883-5p通过靶向AR-V7抑制恩杂鲁胺耐药前列腺癌的分子机制研究

　　本研究针对去势抵抗性前列腺癌(CRPC)中恩杂鲁胺耐药的关键难题，揭示了昼夜节律基因PER1转录的miR-6883-5p通过直接靶向AR-V7抑制肿瘤增殖的新机制。研究人员发现该miRNA能负调控CLOCK表达并参与昼夜节律转录翻译反馈环(TTFL)，为CRPC治疗提供了以生物钟为靶点的新型干预策略。

　　

【研究背景】

前列腺癌(PCa)已成为男性健康的重要威胁，其中去势抵抗性前列腺癌(CRPC)的治疗困境尤为突出。尽管恩杂鲁胺等二代雄激素受体(AR)抑制剂广泛应用，但AR剪接变异体AR-V7（缺乏配体结合域）的出现导致药物耐药成为临床难题。有趣的是，昼夜节律紊乱与PCa发病风险显著相关——夜班工作者和睡眠障碍人群的PCa发病率升高30%，提示生物钟基因可能参与肿瘤进展。

【研究设计与方法】

研究团队通过生物信息学分析和临床样本验证，发现昼夜节律核心基因PER1及其转录产物miR-6883-5p在PCa中显著下调。采用恩杂鲁胺耐药细胞株构建（LNCaP EnzR和C4-2 EnzR）、双荧光素酶报告基因检测、Lumicycle生物节律分析等技术，结合裸鼠移植瘤模型，系统研究了miR-6883-5p的功能机制。

【主要结果】

1. 1.

   PER1下调与PCa不良预后相关

   通过GEPIA数据库和36例临床样本证实，PER1在PCa组织和细胞系中表达降低，其低表达与T3-4分期、淋巴结转移和生存率下降显著相关。

2. 2.

   miR-6883-5p靶向抑制AR-V7

   该miRNA通过结合AR-V7的3'UTR抑制其翻译，使耐药细胞的IC₅₀值降低5倍。动物实验显示瘤内注射miR-6883-5p agomir可使肿瘤体积缩小42%。

3. 3.

   生物钟基因的调控网络

   BMAL1/CLOCK异源二聚体促进PER1转录，而miR-6883-5p又反馈抑制CLOCK表达，形成动态平衡。Lumicycle实验证实该miRNA能延长U2OS细胞的节律周期达28%。

【创新意义】

该研究首次揭示PER1-miR-6883-5p-AR-V7轴在CRPC中的双重调控作用：既通过表观遗传调控克服恩杂鲁胺耐药，又参与维持昼夜节律稳态。发表于《Non-coding RNA Research》的这项成果，为开发基于生物钟调节的PCa治疗方案提供了新靶点。

【技术亮点】

• 耐药细胞模型构建（6个月梯度浓度诱导）

• 双荧光素酶报告系统验证miRNA-靶基因互作

• 人类原代肿瘤组织样本分析（n=36）

• 节律基因功能研究（U2OS-BMAL1-LUC-Luci细胞系）

• 体内外功能验证（CCK-8、克隆形成、IHC）

【讨论延伸】

研究揭示了进化上独特的调控机制——仅在人类PER1基因中存在的miR-6883-5p，可能解释为何昼夜节律紊乱对人类肿瘤的影响尤为显著。作者指出，未来需探索内源性miR-6883-5p节律性表达对AR-V7的动态调控，这将为"时间疗法"在CRPC中的应用奠定基础。