新型羟基嘧啶酮/嘧啶二酮类LDHA抑制剂的合成、分子建模与药效评价：靶向肿瘤糖酵解通路的新策略

　　【编辑推荐】本研究针对肿瘤Warburg效应关键酶LDHA（乳酸脱氢酶A），通过结构优化获得新型嘧啶二酮类化合物HP19（IC50=5.2 μM），可显著抑制乳酸生成、降低H3K18乳酰化修饰，并通过G1/S期阻滞诱导PANC-1细胞凋亡，为克服现有LDHA抑制剂临床转化障碍提供了新化学骨架。

　　

【Highlight】

糖酵解速率检测

采用Seahorse XFe96细胞能量代谢分析系统（Agilent）实时监测MIA PaCa-2细胞的糖酵解质子外排率（glycoPER）。经10-30 μM的ZINC2783354处理6小时后，该化合物可特异性抑制糖酵解途径产生的乳酸堆积，这种效应在60分钟监测期内呈现浓度依赖性。

结论

本研究证实羟基嘧啶酮衍生物HP19作为新型LDHA抑制剂具有双重作用：在生化水平上（IC₅₀=5.2 μM）直接阻断酶活性，在细胞层面则通过耗竭ATP、诱导G1/S期阻滞和凋亡通路抑制PANC-1细胞增殖（IC₅₀=22.7 μM）。其独特的非酸性结构规避了传统LDHA抑制剂常见的细胞渗透性缺陷，为开发靶向肿瘤代谢的临床候选药物奠定了重要基础。

【Glycolytic rate assay】

基于本实验室已建立的方法，将MIA PaCa-2细胞接种于含10 mM葡萄糖的XFp微孔板，化合物21处理组与DMSO对照组比较显示：在pH 7.4的XF DMEM培养基中，该羟基嘧啶酮类分子能显著改变肿瘤细胞的能量代谢图谱。

【Statistical analysis】

使用GraphPad Prism 9.0进行统计学处理，所有生物学实验均设置三次重复。采用单因素方差分析（ANOVA）与Dunnett多重比较检验，显著性阈值设定为p≤0.05，数据报告包含95%置信区间（n>3）。