普那霉素联合用药策略对抗皮肤感染源甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)的协同效应与分子机制研究

　　本研究针对日益严重的甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)和大环内酯类耐药金黄色葡萄球菌(McRSA)皮肤感染问题，通过分析154株临床分离株的耐药特性及分子机制，发现普那霉素(PST)与多西环素或左氧氟沙星联用具有显著协同效应（协同率分别为82.13%和70.14%），为临床治疗多重耐药菌感染提供了新的联合用药方案。

　　

在当今抗菌药物耐药性危机日益严峻的背景下，皮肤及软组织感染中甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus, MRSA)和大环内酯类耐药金黄色葡萄球菌(Macrolide-Resistant Staphylococcus aureus, McRSA)的流行已成为全球公共卫生领域的重大挑战。这些耐药菌株不仅导致治疗失败率上升，还显著延长患者住院时间并增加医疗成本。特别是对最后防线药物如万古霉素、利奈唑胺等出现耐药性的菌株，更使得临床治疗选择变得极其有限。在这一背景下，源自普拉斯特链霉菌的天然链霉素类药物普那霉素(Pristinamycin, PST)因其独特的双组分协同杀菌机制和较低的临床使用率，重新引起研究人员的关注。

本研究由穆阿斯·苏莱曼(Muath Suliman)等学者开展，旨在探究埃及主要三级医院中皮肤感染来源MRSA的流行情况，评估普那霉素与多种抗生素联合使用的协同效应，并深入分析其耐药分子机制。研究成果发表在《BMC Infectious Diseases》期刊，为临床治疗多重耐药金黄色葡萄球菌感染提供了重要的实验依据。

研究人员采用了一系列关键技术方法开展本研究：通过Vitek-2自动化系统对154株临床分离金黄色葡萄球菌进行鉴定；按照CLSI(2021)标准进行22种抗菌药物的药敏试验；采用微量肉汤稀释法测定普那霉素的最低抑菌浓度(MIC)；通过PCR技术检测nuc、mecA、ermA、ermC和msrA等耐药基因；使用棋盘法试验评估五种普那霉素联合用药方案的相互作用效果；基于热图分析(Euclidean距离)研究菌株的表型相关性；计算多重耐药指数(MAR index)评估菌株耐药程度。

研究结果揭示了重要发现：

抗菌敏感性特征显示，从伤口(40.9%)、脓肿(37.0%)、烧伤(14.3%)和手术部位(7.8%)获得的154株金黄色葡萄球菌中，43.5%(n=67)为多重耐药(MDR)菌株。这些菌株对青霉素(87%)、氨苄西林(70%)和红霉素(67.5%)耐药率最高，而对利奈唑胺(5.2%)、万古霉素(9.1%)、替考拉宁(9.1%)、氯霉素(12.3%)和多西环素(14.9%)保持较好敏感性。

MDR分离株的耐药谱分析发现，所有MDR菌株(n=67)均对头孢西丁(MRSA表型)、红霉素和克拉霉素(McRSA表型)不敏感，对克林霉素(80%)、阿奇霉素(74.6%)和普那霉素(46.2%)也表现出较高耐药率。MAR指数范围为0.31-1.0，其中2株(2.98%)表现为泛耐药(PDR)表型。

分子特征鉴定确认所有MDR分离株均携带nuc基因(100%)，证实为金黄色葡萄球菌；mecA基因(100%)检测证实全部为MRSA菌株。大环内酯类耐药基因ermC(49.25%)、ermA(26.8%)和msrA(23.8%)的分布揭示了耐药分子基础。

表型相关性热图分析显示67株MDR分离株呈现47种分组模式，表明这些菌株具有高度多样性且无克隆相关性。

普那霉素联合用药评估结果表明，普那霉素-多西环素(PST-DO)组合在82.13%的菌株中呈现协同作用(ΣFIC≤0.5)，普那霉素-左氧氟沙星(PST-LEV)组合在70.14%的菌株中呈现协同作用。普那霉素-利奈唑胺(PST-LNZ)组合主要呈现相加效应(67%)，而普那霉素-头孢西丁(PST-FOX)和普那霉素-庆大霉素(PST-CN)组合分别有71.6%和52.2%的菌株表现为无关效应。

研究结论与讨论部分强调，本研究首次系统报道了埃及三级医院皮肤感染来源MRSA菌株中普那霉素与多西环素或左氧氟沙星联合使用的显著协同效应。尽管大环内酯类-林可酰胺类-链阳霉素B(MLSB)表型在临床分离株中普遍存在，但普那霉素仍保持较好的抗菌活性，这与先前研究认为MLSB表型本身不足以产生普那霉素耐药的观点一致。

该研究的重大意义在于：为治疗MRSA和McRSA皮肤感染提供了新的联合用药方案，特别是普那霉素-多西环素和普那霉素-左氧氟沙星组合的高协同率为临床治疗提供了优选方案；揭示了埃及地区MRSA菌株的耐药基因分布特征，ermC基因的高流行率(49.25%)为当地耐药机制研究提供了重要数据；证实普那霉素作为不常用抗生素仍保持较好抗菌活性，支持其作为后备药物的临床价值；研究结果对制定抗生素合理使用策略和医院感染控制措施具有重要指导意义。

研究人员建议对普那霉素与多西环素或左氧氟沙星的联合方案进行临床评价，以验证其在实际患者治疗中的效果和安全性。这一研究为应对日益严峻的抗菌药物耐药性问题提供了新的思路和解决方案，具有重要的临床转化价值和公共卫生意义。