基于顶空进样与溶剂泄压模式的GC–MS/MS法同步测定不同药物剂型中六种亚硝胺的开发与验证及其方法学比较

　　本综述系统阐述了通过GC–MS/MS结合顶空（HS）模块与溶剂泄压自动进样器模式，同步检测药物制剂中六种亚硝胺污染物的分析方法开发与验证。研究覆盖悬浮剂、乳剂和片剂等多种剂型，在线性范围（R2 > 0.99）、准确度（回收率79.5–122.4%）和精密度（RSD < 15.0%）方面表现优异，为药品中亚硝胺类基因毒性杂质（cohort of concern）的控制提供了高效、抗基质干扰的分析策略。

　　

Reagents

试剂部分：

气相色谱或质谱级甲醇和水购自Merck（德国）。碳酸钠采购自Isolab（德国）。亚硝胺对照品为固体形式，包括N-亚硝基二甲胺（NDMA）、N-亚硝基二丁胺（NDBA）和N-亚硝基二异丙胺（NDIPA）购自Supelco；N-亚硝基二乙胺（NDEA）、N-亚硝基异丙基乙胺（NEIPA）和N-亚硝基甲基苯胺（NMPA）则分别购自Clearsynth、Amzeal和Toronto Research。

Design of experiment

实验设计：

为优化方法参数，本研究采用Minitab软件实施实验设计（DoE）策略。实验范围涵盖柱温箱温度、样品瓶平衡时间和瓶压参数，其最小值至最大值分别设定为100°C–120°C、15分钟–25分钟和15 Psi–25 Psi。采用全因子设计共9种条件，其中中心点参数为柱温110°C、样品瓶平衡时间20分钟和瓶压20 Psi。

Specificity

专属性：

进行专属性测试以证明分析方法可准确测量各样品中的目标物质，并通过选择性验证表明无基质效应引起的干扰。在选择性试验中，针对三种药品分别进样了空白溶液、安慰剂溶液、单个标准品溶液、单个内标溶液、标准混合溶液、样品溶液及加标亚硝胺的样品溶液。

Limit of detection and quantification (LOD & LOQ)

检测限与定量限（LOD & LOQ）：

该研究通过信噪比法（S/N）确定检测限（LOD）和定量限（LOQ）。LOD定义为信噪比≥3时的浓度，LOQ则为信噪比≥10时的浓度，并进一步通过重复性实验验证其可靠性。

Results and discussions

结果与讨论：

本研究开发并验证了一种使用GC–MS/MS顶空模块测定悬浮剂、乳剂和薄膜衣片中药用亚硝胺的分析方法，并将分析结果与使用GC–MS/MS自动进样器溶剂泄压模式的另一已验证方法进行对比。在产品A、B和C的空白、安慰剂及样品溶液中均未检出亚硝胺。

Conclusion

结论：

本研究旨在通过将更多药物剂型适配于同一分析方法，并共用线性范围与LOD/LOQ参数，从而在更短时间内获得有效结果。由于使用顶空模块可消除安慰剂效应，本方法能成功应用于更复杂的药品成品。对于无法完全溶解的剂型（如半固体制剂、缓释片等），该方法显示出显著优势。