靶向测序联合支气管镜肺泡灌洗在活动性肺结核诊断中的临床效能与转化价值研究

　　本研究针对传统肺结核诊断方法灵敏度低、耗时长等局限性，创新性地将靶向二代测序(tNGS)技术与柔性支气管镜(FB)及支气管肺泡灌洗(BAL)相结合，开展回顾性队列研究。结果显示：相比常规诊断组，支气管镜-tNGS组诊断阳性率(84.8% vs 71.8%)、准确度(87.3% vs 76.1%)显著提升，诊断时间缩短2.2天，住院时间减少3.3天，90天临床好转率提高17个百分点(85.0% vs 68.0%)，且安全性更优。该研究为肺结核特别是涂阴患者的快速精准诊断提供了新范式，具有重要临床转化价值。

　　

在全球传染病负担排名中，肺结核依然位居前列，这种古老的疾病每年仍造成数百万人感染和死亡。尽管现代医学不断进步，但肺结核的诊断却面临着一个尴尬的困境：传统方法要么灵敏度不足，要么耗时过长。特别是对于痰涂片阴性的患者，医生往往如同在迷雾中前行，难以快速确定诊断，导致治疗延迟，患者预后大打折扣。

传统的诊断"三件套"——痰涂片镜检、GeneXpert MTB/RIF检测和分枝杆菌培养——各有局限。痰涂片灵敏度低，培养需要数周时间，而分子检测虽然快速，但在菌量少的情况下也可能漏诊。这就像是用网眼过大的渔网捕鱼，总有漏网之鱼。更令人担忧的是，诊断延迟不仅影响个体治疗，还会增加传播风险，加重医疗负担。

在这一背景下，贵阳市公共卫生治疗中心的研究团队开展了一项创新性研究，探索将柔性支气管镜(FB)与支气管肺泡灌洗(BAL)和靶向下一代测序(tNGS)技术相结合的新诊断策略。这项研究发表在《Current Problems in Surgery》上，为解决肺结核诊断困境提供了新的思路。

研究人员采用了几项关键技术方法：首先建立了150例疑似肺结核患者的回顾性队列，分为常规诊断组(71例)和支气管镜-tNGS组(79例)；运用柔性支气管镜技术进行直视下气道检查和靶向灌洗采样；采用靶向下一代测序(tNGS)技术对BAL样本进行病原体检测；通过复合参考标准(包括微生物学确认和临床诊断)进行诊断准确性评估；并采用多参数分析包括诊断效能、时间指标、临床转归、炎症标志物和安全性等综合评价体系。

比较两组基线特征和诊断效能

研究结果显示两组患者在年龄、性别分布、症状严重程度评分和基础疾病等方面具有良好可比性。支气管镜-tNGS组展现出显著优势：诊断阳性率更高(84.8% vs 71.8%)，诊断准确度更优(87.3% vs 76.1%)。时间效率明显改善，诊断时间缩短(5.2±1.5天 vs 7.4±2.0天)，采样到结果时间减少(1.4±0.9天 vs 3.8±1.5天)，住院时间缩短(12.3±4.5天 vs 15.6±5.0天)。治疗启动率也更高(89.9% vs 77.5%)。

比较常规组与支气管镜-tNGS组的临床结果和长期疗效

支气管镜-tNGS组表现出更优异的诊断性能，诊断灵敏度(92.0% vs 78.0%)和诊断特异度(90.0% vs 76.0%)均显著提高。临床结果方面，支气管镜-tNGS组90天良好临床反应率更高(85.0% vs 68.0%)，经验性治疗率显著降低(6.0% vs 22.0%)，再入院率减少(7.0% vs 18.0%)。临床症状改善率(85.0% vs 65.0%)和生活质量评分改善率(78.0% vs 58.0%)也都明显更优。

支气管镜-tNGS改善呼吸功能和临床结果

呼吸参数分析显示支气管镜-tNGS组在所有测量指标上均有显著改善：呼吸频率更低(19.8 vs 22.1次/分)，血氧饱和度更高(94.5% vs 92.0%)，动脉血氧分压更好(78.0 vs 68.0 mmHg)。胸部听诊异常恢复更快(1.7 vs 2.5)，胸部影像 resolution 评分更优(1.9 vs 2.6)。肺功能测试也一致显示支气管镜-tNGS组呼吸改善更佳，包括更高的用力肺活量(FVC)(2.8 vs 2.3 L)，改善的1秒用力呼气量(FEV₁)(2.3 vs 1.7 L)，增加的峰值呼气流速(PEF)(340 vs 280 L/min)，和更有利的呼吸商(RQ)(0.82 vs 0.88)。

支气管镜-tNGS提供更适宜治疗并减少炎症

炎症标志物分析显示，支气管镜-tNGS组在治疗开始后所有八项测量的炎症指标均呈现炎症减轻的一致模式：白细胞计数(11.0 vs 14.2×10⁹/L)、C反应蛋白(CRP)(35.0 vs 50.0 mg/L)、降钙素原(PCT)(0.7 vs 1.2 ng/mL)、血沉(ESR)(33.0 vs 45.0 mm/h)、白细胞介素-6(IL-6)(28.0 vs 40.0 pg/mL)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)(17.0 vs 22.0 pg/mL)、白细胞介素-10(IL-10)(8.5 vs 12.0 pg/mL)和中性粒细胞-淋巴细胞比率(NLR)(3.0 vs 4.0)。研究还通过图像展示了支气管肺泡灌洗(BAL)使用纤维支气管镜进行痰液采集的完整过程。

支气管镜-tNGS增强临床恢复和功能状态

功能评估数据显示，支气管镜-tNGS组在所有测量参数上结果显著更好：临床改善评分更高(7.8 vs 5.9)，症状 resolution 评分更优(8.2 vs 6.1)，咳嗽严重程度评分明显改善(1.8 vs 2.8)。功能独立性测量也支持支气管镜-tNGS干预，表现状态评分更高(80.0 vs 65.0)和日常生活活动(ADL)评分更优(75.0 vs 60.0)。生活质量通过标准化问卷评估，支气管镜-tNGS组更佳(76.0 vs 62.0)。恢复参数显示类似趋势，支气管镜-tNGS组获得更好的体力活动耐受评分(70.0 vs 55.0)和更快的六分钟步行测试距离(350 vs 280米)。

支气管镜-tNGS展示改善的安全性特征

安全性分析显示，支气管镜-tNGS组在所有测量指标上安全性特征显著更好：总体不良事件率显著更低(15.0% vs 25.0%)。手术相关并发症两组相当，显示支气管镜是安全的诊断程序，轻度出血(6.0% vs 4.0%)和短暂性低氧血症(5.0% vs 4.0%)率无显著差异。支气管镜-tNGS组因更靶向的治疗而表现出更少的治疗相关并发症，包括较低的药物相关不良事件率(10.0% vs 18.0%)、肝毒性(5.0% vs 12.0%)和肾毒性(3.0% vs 8.0%)。总体药物不良反应率也较低(12.0% vs 20.0%)。

影响诊断准确性的多因素分析

森林图显示了各种风险因素与诊断准确性之间的关联，所有因素均显示统计学显著性。既往抗结核治疗是最强的负面因素，风险比(HR)为2.80，其次是HIV合并感染(OR=2.20)和广泛肺受累(HR=2.10)。免疫抑制治疗史(OR=1.80)、糖尿病(OR=1.70)和空洞病变(OR=1.70)也显示出相对较高的诊断挑战影响。吸烟状况、细菌负荷和男性性别都显示中等效应(HR约1.40-1.50)。高血压(OR=1.30)、营养不良(OR=1.15)、肝功能(OR=1.08)、肾功能(OR=1.04)和年龄(OR=1.03)虽然影响相对较低，但仍保持统计学显著性。

研究结论和讨论部分强调，支气管镜联合支气管肺泡灌洗进行tNGS分析显著改善了肺结核诊断，准确度(88% vs 76%)和灵敏度(92% vs 78%)更高，诊断时间更短，住院时间减少。该方法显示出更好的临床结果和更少的不良事件。既往结核治疗、HIV状况和肺部受累情况对诊断结果影响最大。这种方法对疑难病例很有价值，但需要进一步研究复杂和耐药结核的应用。

这项研究的重要意义在于它为解决肺结核诊断中的关键难题提供了切实可行的解决方案。通过将先进的分子诊断技术与微创采样方法相结合，不仅提高了诊断的准确性，还显著缩短了诊断时间，这对于控制结核传播、改善患者预后具有重要意义。特别是在资源有限 settings 中，这种快速准确的诊断方法可以帮助更合理地分配医疗资源，避免不必要的经验性治疗，减少药物不良反应和耐药性的发生。

研究还揭示了影响诊断准确性的关键因素，为临床医生识别诊断挑战更大的患者群体提供了依据。对于有既往结核治疗史、HIV感染或广泛肺部病变的患者，可能需要更积极的诊断策略，而支气管镜-tNGS组合正好满足了这一需求。

尽管这项研究取得了令人鼓舞的结果，但作者也指出需要进一步研究在更复杂情况下的应用，如耐药结核和合并其他并发症的患者。未来研究可以探索这种组合诊断策略在更广泛人群中的应用价值，以及其成本效益和在不同医疗 settings 中的可行性。

总之，这项研究为肺结核诊断领域带来了新的希望，证明通过技术创新和方法整合，可以显著改善这一全球重要传染病的诊断和管理水平，最终为减少结核病的疾病负担做出贡献。