新型叶酸-α-生育酚偶联物VAF靶向肺癌细胞的抗癌特性评估及其机制研究

　　为解决传统化疗药物缺乏选择性、毒副作用大的问题，研究人员开展了一种新型叶酸-α-生育酚偶联物（VAF）的合成及其靶向抗癌活性研究。结果表明，VAF通过叶酸受体（FRα）介导的内吞作用选择性进入肺癌细胞A549，显著抑制癌细胞增殖并诱导凋亡，同时对正常肺细胞Wi-38毒性较低。该研究为开发高效低毒的靶向抗癌药物提供了新策略。

　　

癌症是全球发病率和死亡率最高的疾病之一，尤其肺癌中的非小细胞肺癌（NSCLC）占病例的85%，缺乏有效靶向治疗手段。传统化疗药物无法区分癌细胞和正常细胞，导致严重毒副作用。近年来，靶向治疗成为研究热点，其中叶酸受体（Folate Receptor alpha, FRα）在多种癌细胞（如肺癌、乳腺癌）表面过度表达，而在正常组织中表达极低，使其成为理想的药物靶点。同时，α-生育酚（α-Tocopherol）作为维生素E的主要形式，不仅具有抗氧化特性，还被发现可抑制癌细胞增殖并诱导凋亡。然而，如何将这两种天然分子的优势结合，构建既能精准靶向又具有治疗活性的新型化合物，成为研究人员关注的重点。

在此背景下，Shams H. Abdel-Hafez和Shaimaa M. I. Alexeree在《BMC Cancer》上发表研究，成功合成了一种新型叶酸-α-生育酚偶联物（VAF），并评估了其对肺癌细胞的靶向抗癌效果。该研究通过将叶酸（Folic Acid, FA）与α-生育酚通过肽键连接，形成两亲性结构，使其能够在水溶液中自组装，并通过叶酸受体介导的内吞作用特异性进入癌细胞，实现靶向药物递送和治疗的双重功能。

研究人员主要采用以下关键技术方法：通过肽键合成法构建VAF偶联物，并使用傅里叶变换红外光谱（FT-IR）和核磁共振（NMR）进行结构表征；以人肺癌细胞A549和正常肺细胞Wi-38为模型，通过WST-1试剂检测细胞活力和IC₅₀；利用共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）结合吖啶橙（AO）和碘化丙啶（PI）染色，观察细胞存活和死亡情况。

研究结果部分，通过“表征偶联物（VAF）”发现，FT-IR光谱显示VAF在3318 cm^-1和3126 cm^-1处出现N-H伸缩振动峰，在1640 cm^-1和1612 cm^-1处出现酰胺I带（C=O伸缩），证实肽键成功形成。NMR谱进一步显示羧酸质子（δ 12.50 ppm）、酰胺质子（δ 11.55和10.50 ppm）以及叶酸和生育酚特征峰的存在，说明偶联物结构完整。

在“体外细胞毒性”实验中，VAF对A549细胞表现出剂量依赖性毒性，在60 μg/mL时细胞存活率降至20%，IC₅₀约为30 μg/mL；而对正常Wi-38细胞，即使在高浓度下存活率仍保持85%以上，表明VAF具有显著选择性毒性。

“细胞活力评估”比较了VAF、游离叶酸和α-生育酚的效果：在A549细胞中，VAF在10 μg/mL时即表现出显著抑制效应，而单独使用叶酸或生育酚效果有限；在Wi-38细胞中，VAF几乎无影响，但高剂量游离叶酸或生育酚则产生毒性，证明偶联后靶向性增强。

“肺细胞共聚焦图像”显示，经VAF处理的A549细胞出现大量红色（PI染色）死亡细胞，比例达66%，而游离化合物组死亡细胞比例较低（85%-96%）。Wi-38细胞在VAF处理后仍以绿色（AO染色）活细胞为主，与对照组无异，进一步证实VAF对癌细胞的选择性杀伤作用。

研究结论和讨论部分强调，VAF通过叶酸受体（FRα）靶向机制和α-生育酚的抗癌活性，实现了对肺癌细胞的高效选择性杀伤。其重要意义在于：第一，VAF利用癌细胞过度表达的FRα实现精准递送，减少对正常细胞的损害，有望降低化疗毒副作用；第二，该偶联物由天然分子构成，生物相容性好，符合绿色治疗趋势；第三，研究为开发类似天然偶联靶向药物提供了合成和评价范式。未来需进一步开展体内药代动力学和机制研究，推动其临床转化。