PLK1通过激活NPM1介导的自噬促进胶质母细胞瘤对替莫唑胺耐药的机制研究

　　本研究发现PLK1通过促进NPM1丝氨酸4位点磷酸化（p-NPM1-S4）激活自噬，从而增强胶质母细胞瘤（GBM）对替莫唑胺（TMZ）的耐药性。抑制PLK1可逆转TMZ耐药性，为GBM治疗提供新靶点。

　　

Abstract

Purpose

多形性胶质母细胞瘤（GBM）对替莫唑胺（TMZ）化疗的耐药性是治疗中的重大挑战。Polo样激酶1（PLK1）作为丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族成员，在GBM中发挥促癌作用。本研究探讨PLK1和核磷蛋白1（NPM1）在GBM细胞对TMZ化疗敏感性及自噬调控中的作用，并深入解析其分子机制与信号通路。

Methods

通过逐步增加TMZ剂量构建TMZ耐药GBM细胞系。采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）、凋亡检测和克隆形成实验评估shPLK1处理的U87-MG/TMZ和SHG141/TMZ细胞的TMZ耐药性。通过电镜和蛋白质印迹（Western blot）检测自噬水平。在裸鼠异种移植瘤和脑模型中进行PLK1的体内效应分析。

Results

GBM组织中PLK1表达显著高于正常组织，且与患者总体生存率呈负相关。PLK1增强了TMZ诱导的自噬并抑制凋亡性细胞死亡。shPLK1可提高GBM细胞对TMZ的敏感性，减少TMZ诱导的自噬。PLK1通过促进NPM1丝氨酸4位点磷酸化（p-NPM1-S4）驱动自噬。体内实验证明PLK1抑制剂BI2536能增加程序性细胞死亡、增强TMZ疗效，并通过靶向p-NPM1-S4抑制自噬。

Conclusions

抑制PLK1可通过调控NPM1丝氨酸4磷酸化有效抑制自噬、细胞增殖、TMZ耐药性和肿瘤发生，同时促进GBM细胞凋亡。靶向PLK1为GBM治疗提供了具有潜力的策略。