葡萄渣与槲皮素协同治疗银屑病：基于PG-PEVs纳米载体的可持续皮肤治疗策略

　　本研究针对银屑病治疗中传统疗法副作用大、天然成分生物利用度低的问题，开发了负载Cannonau葡萄渣提取物和槲皮素的PG-PEVs（含丙二醇的穿透增强囊泡）纳米载体。该载体表现出高稳定性（粒径~172 nm，Zeta电位~-46 mV）和包封率（≥82%），并在体外和体内模型中显著抑制氧化应激、炎症和角质细胞过度增殖，MPO水平从353降至179 ng/mL。研究为银屑病提供了可持续的天然治疗方案，并符合循环经济理念。

　　

银屑病是一种影响全球数百万人的慢性炎症性皮肤病，其特征包括表皮过度增生、红斑和鳞屑，目前治疗方法如皮质类固醇和免疫抑制剂虽能缓解症状，但长期使用会导致严重副作用，患者依从性低。因此，开发安全有效的替代疗法成为研究热点。天然多酚类化合物因其强大的抗氧化和抗炎活性备受关注，但它们的临床应用受到低生物利用度、化学稳定性差和皮肤渗透能力有限的限制。

在这项发表于《Journal of Drug Delivery Science and Technology》的研究中，意大利卡利亚里大学的Matteo Perra等研究人员探索了一种可持续的方法，利用酿酒副产物Cannonau葡萄渣提取物（富含多酚）与槲皮素结合，开发用于银屑病治疗的有效制剂。该提取物通过环保工艺获得，并封装于含有丙二醇的磷脂囊泡（PG-PEVs）中，以增强其稳定性和皮肤渗透性。

研究采用的关键技术方法包括：利用动态光散射（DLS）表征囊泡的粒径、多分散指数（PDI）和Zeta电位；通过透析和DPPH法测定包封效率和抗氧化活性；使用小角X射线散射（SAXS）分析囊泡纳米结构；流变学测试评估制剂黏弹性；体外实验用人角质形成细胞（HaCaT）评估生物相容性和保护作用（MTT法）；体内实验采用TPA诱导的小鼠银屑病样模型，通过组织学分析和髓过氧化物酶（MPO）活性测定炎症和中性粒细胞浸润。

3.1. 葡萄渣提取物的提取与表征

Cannonau葡萄渣提取物通过固液萃取法获得，总酚含量为185.1 ± 10.4 mg GAE/g，其中花青素和黄烷-3-醇是最丰富的酚类成分，分别为6.12和11.16 mg/g干提取物。

3.2. 囊泡的制备与表征

PG-PEVs由磷脂（Lipoid S75）、提取物（30 mg/mL）和/或槲皮素（5 mg/mL）在丙二醇:水（20:80）中水合制备。负载提取物的囊泡粒径显著增加（至~172 nm），而槲皮素单独负载不影响粒径。所有制剂均呈现高负Zeta电位（~-46 mV）和高包封率（≥82%），且Quercetin PG-PEVs的均一性较低（PDI ~0.38）。制剂在4°C下储存18个月保持稳定。

3.3. 抗氧化活性评估

DPPH测定显示，提取物分散体的抗氧化活性为70%，而负载到PG-PEVs后，Cannonau PG-PEVs的活性升至80%，表明磷脂与多酚的协同效应。槲皮素负载并未显著改变活性。

3.4. 制剂稳定性

长期稳定性研究表明，除Quercetin PG-PEVs外，其他制剂在18个月内粒径、PDI和Zeta电位均保持稳定，Quercetin PG-PEVs的均一性随时间下降。

3.5. 小角X射线散射分析

SAXS揭示空囊泡呈现28 nm层状间距的多层结构，而提取物负载后间距减小至5.1 nm，表明囊泡壁多层性增加，亲水性成分影响层间水合作用。

3.6. 流变学特性

振幅和频率扫描显示，负载天然化学品的PG-PEVs呈现凝胶样行为（G' > G''），且具有剪切稀化特性，适合皮肤应用。

3.7. 生物相容性评估

MTT实验表明，所有制剂在测试浓度下均高度生物相容（细胞存活率≥80%），仅最高浓度槲皮素分散体显示轻微毒性。

3.8. 抗氧化应激保护作用

在过氧化氢诱导的氧化应激模型中，CQ PG-PEVs处理使细胞存活率恢复至93%，显著优于未处理组（61%）。

3.9. 抗过度增殖作用

TPA刺激使角质细胞增殖至133%，而Cannonau PG-PEVs和CQ PG-PEVs处理使增殖恢复正常水平（~100%）。

3.10. 体内皮肤保护作用

在小鼠TPA诱导的银屑病样模型中，PG-PEVs处理显著降低MPO活性（从353降至179 ng/mL），减轻皮肤炎症、增厚和坏死。组织学显示炎症浸润和表皮厚度减少。

3.11. 组织学检查

定量分析证实，PG-PEVs处理组表皮厚度和炎症细胞浸润显著降低，CQ PG-PEVs效果最佳（浸润评分0.6 vs. TPA组2.6）。

研究结论表明，Cannonau葡萄渣提取物负载的PG-PEVs能有效缓解银屑病关键病理特征，包括氧化应激、炎症和过度增殖。该制剂不仅提高了多酚的稳定性和递送效率，还通过利用农业副产物实现了可持续性目标。尽管槲皮素的添加未显示显著协同效应，但富集了制剂的生化谱，可能在其他病理背景下提供补充益处。这些发现为开发基于天然成分的银屑病治疗提供了坚实依据，并支持将农业副产物转化为高价值化妆品的原则。