LicD介导的细胞壁修饰调控粪肠球菌临床分离株的噬菌体敏感性及其治疗潜力

　　本研究首次揭示LicD基因介导的磷酸胆碱修饰（phosphorylcholine）作为粪肠球菌（E. faecalis）噬菌体感染的关键靶点，分离的三株Kochikohdavirus噬菌体对万古霉素耐药菌株展现广谱裂解活性（宿主范围>90%）和强效生物膜降解能力（降解率>80%），其诱导的噬菌体不敏感突变株（BIMs）表现出抗生素敏感性逆转和毒力衰减，为耐药菌感染提供了新型治疗策略。

　　

Highlight

从废水处理厂分离的三株新型噬菌体APTC-Efa.10/16/20均属于Kochikohdavirus属，呈现典型肌尾噬菌体（myovirus）形态：200纳米收缩性尾丝和89纳米二十面体衣壳。其中APTC-Efa.16吸附速率最快（k=1.1×10^?10 mL/min），其独特尾丝蛋白结构可能解释宿主范围差异。

Bacterial strains collection and identification

噬菌体宿主采用粪肠球菌（Enterococcus faecalis）ATCC 700802标准菌株（临床血液分离源）。另收集糖尿病足感染（4株）和慢性鼻窦炎（CRS）（2株）患者分离的临床菌株，所有样本获取均通过中央阿德莱德地方卫生网络伦理委员会审批。

Isolation and characterization of three novel phages targeting vancomycin resistant E. faecalis

全基因组测序显示三株噬菌体基因组大小介于151-154 kbp之间，平均GC含量35.5%。APTC-Efa.16和APTC-Efa.20能裂解13株测试菌中的12株（92.3%），而APTC-Efa.10仅感染9株（69.2%）。敏感菌株均检测到licD基因（磷酸胆碱转移酶编码基因），该基因缺失株表现出噬菌体抗性。

Discussion

LicD介导的细胞壁磷酸胆碱修饰被证实为噬菌体吸附的关键受体。全基因组预测显示所有噬菌体均携带解聚酶（depolymerase）编码基因，体外实验证实其能有效瓦解生物膜基质（生物膜生物量减少>80%）。噬菌体处理12小时后出现的逃逸突变株（BIMs）对万古霉素敏感性提高4倍，且 macrophage（THP-1巨噬细胞）吞噬抗性和生物膜形成能力显著减弱。

Conclusion

本研究首次建立粪肠球菌细胞壁磷酸胆碱修饰与噬菌体敏感性的直接关联，三株新型噬菌体对临床耐药菌株展现卓越的裂解活性和生物膜清除能力，其诱导的BIMs表现出抗生素增敏和毒力衰减，为开发针对顽固性生物膜感染的噬菌体鸡尾酒疗法提供理论基础。