利用mRNA编码靶向PcrV单克隆抗体应对耐药铜绿假单胞菌感染的新策略

　　本研究针对日益严重的抗生素耐药性问题，特别是铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）感染，开发了mRNA编码的靶向III型分泌系统蛋白V（PcrV）的单克隆抗体（mAbs）。研究人员从免疫小鼠B细胞中筛选出高亲和力抗体M2C10和M4C12，通过体外和体内实验证明其显著抗菌活性，尤其在急性感染模型中，M2C10-mRNA有效提高小鼠存活率、降低菌载量并减轻组织损伤，为替代传统抗生素提供了新方案。

　　

抗生素耐药性的蔓延已成为全球公共卫生领域的重大挑战，其中铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）因其多重耐药性和高致病性备受关注。这种常见的机会性病原体可引起医院获得性肺炎、血流感染和软组织感染，尤其对免疫低下患者威胁极大。传统抗生素疗法效果日益有限，亟需开发新型治疗策略。在这一背景下，单克隆抗体（mAbs）技术因其高度特异性和低毒性展现出潜力，但生产成本高、递送效率低等问题限制了其应用。近年来，mRNA（信使核糖核酸）技术的崛起为抗体疗法提供了新思路——通过将抗体编码序列导入体内，直接利用宿主细胞表达功能性抗体，从而实现高效、灵活的免疫治疗。

针对这一需求，研究人员在《Molecular Therapy》发表了一项创新性研究，探索利用mRNA编码靶向PcrV（III型分泌系统关键蛋白）的单克隆抗体，以对抗耐药铜绿假单胞菌感染。PcrV蛋白在细菌致病过程中起核心作用，负责毒素注入宿主细胞，破坏其免疫功能。通过抑制PcrV，可有效阻断细菌的毒性机制，为宿主免疫系统清除感染创造机会。

研究团队首先从免疫小鼠的B细胞中筛选抗体，获得了两株与PcrV结合亲和力最高的单克隆抗体M2C10和M4C12。这些抗体经表达纯化后，被编码成mRNA形式，用于后续功能实验。关键技术方法包括：从小鼠B细胞中筛选高亲和力抗PcrV单克隆抗体；体外表达和纯化抗体蛋白；构建mRNA载体并进行体外转录；通过细胞实验评估抗体中和活性；使用特定病原体自由（SPF）雄性BALB/c小鼠建立急性全身感染和肺炎模型，评估存活率、组织菌载量和病理变化。

研究结果部分，体外实验显示，M2C10和M4C12均能显著抑制铜绿假单胞菌的毒性，表现出高抗菌活性。在体内实验中，研究人员建立了两种小鼠感染模型：急性系统性感染和肺炎模型。在急性感染模型中，接受M2C10-mRNA治疗的小鼠存活率大幅提升，组织（如肺、肝和脾）中的细菌负载明显降低，组织病理学分析显示损伤显著减轻。相比之下，M4C12-mRNA虽也有效，但效果略逊于M2C10-mRNA。在肺炎模型中，M2C10-mRNA同样表现出优越的保护作用，减少了肺部细菌定植和炎症损伤。

研究结论表明，mRNA编码的单克隆抗体——尤其是M2C10——能有效中和PcrV蛋白，抑制铜绿假单胞菌的致病性，在急性和局部感染模型中均提供显著保护。这一策略不仅规避了传统抗体疗法的生产与递送瓶颈，还实现了快速、可调控的体内抗体表达。讨论部分进一步强调，该研究为应对抗生素耐药性挑战提供了创新方案，具有转化为临床应用的潜力，可作为现有抗生素疗法的替代或辅助手段。未来研究可探索多种抗体组合或联合其他治疗方式，以扩展其应用范围。

综上，该研究通过整合免疫学、分子生物学和mRNA技术，开创了抗感染治疗的新途径，对应对全球耐药菌威胁具有重要意义。