HSPH1通过Sp2/HSPH1信号通路介导丙烯酰胺诱导的小鼠精原干细胞凋亡与自噬

　　本研究揭示丙烯酰胺（ACR）通过激活Sp2/HSPH1信号通路诱发氧化应激，进而驱动小鼠精原干细胞（SSCs）自噬与凋亡的分子机制。研究发现转录因子Sp2可结合Hsph1基因启动子调控其表达，而自噬在ACR诱导的细胞死亡中发挥细胞毒性作用，为男性生殖毒性机制提供了新的治疗靶点（HSPH1）。

　　

Highlight

ACR诱导小鼠精原干细胞（SSCs）凋亡与自噬的突破性发现——HSPH1是关键分子开关！

Materials and reagents

丙烯酰胺（ACR，货号A9099）和N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）购自Sigma-Aldrich（美国）。细胞计数试剂盒（CCK8）购自日本同仁化学。抗体包括Caspase-8（sc-7890）、Bcl2（sc-492）、Caspase-3（sc-7148）、Bax（sc-493）和Sp2（sc-17814）均购自Santa Cruz Biotechnology（美国）；LC3（D3U4C）和Beclin1抗体购自Cell Signaling Technology（美国）。

ACR induces apoptosis and autophagy of C18-4 cells

为探究ACR对小鼠精原干细胞的损伤机制，研究团队用2 mM ACR处理C18-4细胞24小时后进行RNA测序。结果显示ACR显著激活凋亡和自噬通路（图1A），并抑制细胞活力（图1B）。Western blot进一步证实ACR上调Cleaved Caspase-8、Cleaved Caspase-3和Bax蛋白表达，下调Bcl2水平（图1C）。同时自噬标志蛋白LC3-II和Beclin1表达升高（图1D），电镜观察到典型自噬小体（图1E）——这些证据共同表明ACR能同时诱发C18-4细胞凋亡与自噬。

Discussion

ACR通过呼吸道、消化系统和皮肤进入机体，其水溶性特性导致多组织分布。本研究首次证实ACR通过激活Sp2/HSPH1信号通路诱发氧化应激，进而驱动精原干细胞自噬与凋亡。自噬在此过程中扮演"细胞死亡帮凶"角色，抑制自噬可显著缓解ACR诱导的凋亡。该发现为男性生殖毒理机制提供了新视角，提示靶向HSPH1可能是治疗ACR所致生殖损伤的潜在策略。

Conclusion

本研究首次揭示：

1. 1.

   Sp2可转录激活Hsph1基因表达

2. 2.

   HSPH1是ACR诱导C18-4细胞凋亡与自噬的必要因子

3. 3.

   ACR通过诱发氧化应激与Sp2/HSPH1信号通路形成正反馈循环

   该研究为阐明ACR所致精原干细胞损伤机制奠定理论基础，HSPH1有望成为治疗生殖毒性的新靶点。

（注：根据要求已去除文献引用标识[ ]及图示标识Figure 1A等）