苍术内酯III靶向Keap1激活Nrf2/HO-1通路缓解脑缺血再灌注损伤的机制研究

　　本研究揭示天然化合物苍术内酯III（ATL III）通过直接结合Keap1蛋白，激活Nrf2/HO-1抗氧化通路，显著减轻脑缺血再灌注损伤（CIRI）。该发现为开发植物源性脑卒中预防药物提供了重要理论依据，具有显著的转化医学价值。

　　

^Highlight

^{Chemicals and reagents}

ATL III（纯度 > 98%，HPLC，货号B20056）和ML385（纯度 > 99%，HPLC，货号S86700）购自上海源叶生物科技有限公司。EDA（纯度 > 99%，HPLC，货号M70800）和MG132（纯度 > 98%，HPLC，货号M8699）购自Sigma-Aldrich公司。TTC溶液（货号G3005）、BCA蛋白检测试剂盒（货号PC0020）及Annexin V-FITC/PI双染试剂盒（货号CA1020）均购自Solarbio公司。

^{ATL III reduces cerebral infarct volume and neuronal damage in MCAO/R mice}

为评估ATL III对脑缺血再灌注损伤（CIRI）的神经保护作用，我们采用MCAO/R小鼠模型（实验流程见图1A）。与对照组相比，MCAO/R组脑梗死体积显著增加至42%（p < 0.001）。ATL III（10、20和40 mg/kg）治疗以剂量依赖方式显著降低梗死体积，分别降至33%（p < 0.05）、27%（p < 0.01）和20%（p < 0.001），其中40 mg/kg剂量的效果接近阳性药物EDA（17%）。

^Discussion

我们前期研究证实ATL III可缓解氧化应激并保护HT22细胞免受OGD/R损伤（Guo et al., 2024）。本研究在此基础上提供了体内证据：ATL III对CIRI具有显著预防作用，表现为减少MCAO/R小鼠的梗死体积、改善神经功能并减轻组织病理损伤。这些发现与既往报道（Zhou et al., 2019）一致。值得注意的是，我们通过多学科技术组合（网络药理学、分子对接、表面等离子共振和分子动力学模拟）首次鉴定出Keap1是ATL III的直接作用靶点。

^Conclusion

总之，本研究提供有力证据表明：ATL III通过直接结合Keap1并激活Nrf2/HO-1信号通路，从而发挥强大的神经保护作用对抗CIRI。该激活作用增强内源性抗氧化防御、抑制神经元凋亡、减少梗死体积并改善神经功能。鉴于其天然来源、良好安全性及血脑屏障（BBB）穿透性，ATL III具有转化为高危人群预防性药物的潜力。