Grifolin-4-L-ergothioneine通过激活SIRT1/AMPK/NRF2通路改善CCl4诱导的肝细胞损伤机制研究

　　本研究首次从Albatrellus dispansus中分离鉴定新型grifolin衍生物（1和2），并证实化合物1通过激活SIRT1/AMPK/NRF2信号通路，显著改善CCl4诱导的肝损伤，为天然产物治疗急性肝损伤（ALI）提供了新机制和候选分子。

　　

Background

背景

迄今为止，Albatrellus真菌已被报道产生超过80种天然产物，包括具有广泛生物活性的meroterpenoids、sesquiterpenes和N-氧化L-异亮氨酸衍生物。先前研究表明，一类sesquiterpenes——grifolin衍生物具有抗氧化能力。然而，这些grifolin衍生物的鉴定及其肝保护活性以及潜在机制仍有待探索。

Purpose

目的

鉴定从A. dispansus中分离的具有肝保护活性的grifolin衍生物，并在体外（in vitro）和体内（in vivo）阐明其作用机制。

Methods

方法

通过综合光谱分析、ECD谱计算和半合成（Semisynthetic）方法，从A. dispansus中分离和解析grifolin衍生物。通过在CCl₄诱导的AML-12细胞中测量细胞毒性、凋亡和乳酸脱氢酶（LDH）释放，初步筛选所有化合物的肝保护潜力。随后在CCl₄诱导的小鼠肝损伤模型中对最活跃的化合物进行了评估。通过RNA测序、RT-qPCR、Western blotting和免疫荧光染色实验进一步探索其潜在机制，以理解干预途径。

Results

结果

从A. dispansus乙醇提取物中获得两种grifolin衍生物：grifolin-4-L-ergothioneine（1）和grifolin-4,6-L-diergothioneine（2），以及两种已知化合物L-(+)-ergothioneine（3）和grifolin（4）。化合物1-3在体外对CCl₄诱导的肝细胞损伤表现出显著抑制作用。特别是，化合物1以15 mg/kg的剂量给药时，对CCl₄诱导的小鼠肝损伤表现出强效保护作用。机制研究表明，化合物1的肝脏保护作用与其在经典SIRT1/AMPK/NRF2通路中的作用相关。

Conclusion

结论

本研究通过整合体外和体内研究，首次提供了从A. dispansus分离的grifolin衍生物的肝保护作用及潜在机制的全面证据。