高通量筛选揭示芍药苷通过HNF4A/PPARA/LDLR轴改善Apoc2缺陷型高甘油三酯血症的治疗潜力与机制

　　本研究通过CRISPR/Cas9技术构建apoc2基因敲除斑马鱼模型，从351种天然化合物中筛选出芍药苷(PAE)作为高效降甘油三酯剂。研究发现PAE通过激活HNF4A-PPARA-LDLR信号轴，促进肝脏对富含甘油三酯脂蛋白(TRL)的摄取和脂肪酸β-氧化，为治疗遗传性高甘油三酯血症(HTG)和家族性乳糜微粒血症综合征(FCS)提供了新型小分子治疗策略。

　　

¹亮点

• 芍药苷(PAE)通过新型HNF4A-PPARA-LDLR机制显著降低甘油三酯

• CRISPR/Cas9工程化apoc2^-/-斑马鱼再现人类高乳糜微粒血症表型

• 脂质组学分析揭示PAE同时增强β-氧化和自噬性脂解(lipophagy)

• BI-6015抑制实验证实HNF4A是PAE发挥作用的关键上游靶点

²引言

高甘油三酯血症(HTG)定义为空腹血清甘油三酯≥1.7 mmol/L，全球约10%成年人受其影响，是动脉粥样硬化性心血管疾病、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)和慢性肾病的重要独立风险因素。该病常由饮食和代谢紊乱等可调节因素与遗传易感性相互作用引发。严重病例（甘油三酯浓度>10 mmol/L）可能源于脂蛋白脂肪酶(LPL)或其功能调节因子载脂蛋白C2/A5(APOC2/A5)的常染色体隐性功能缺失变异。

虽然生活方式干预和常规降脂药（如贝特类）仍是HTG一线疗法，但家族性乳糜微粒血症综合征(FCS)和难治性获得性病例（甘油三酯>5.65 mmol/L）仍存在显著未满足临床需求。吉非罗齐(GEMF)可降低FCS患者甘油三酯水平，但存在横纹肌溶解风险。新兴疗法靶向APOC3（如Volanesorsen）和血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)（如Evinacumab）等关键调节因子，但ANGPTL3抑制剂对LPL功能正常的FCS疗效有限。

合适疾病模型对药物开发至关重要。斑马鱼因其与人类脂质代谢途径的高度保守性、体型小、维护成本低和发育快速等特点，成为高通量筛选的理想模型。其Lpl与人类LPL具有80%氨基酸同源性，Apoc2的Lpl结合C端结构域与人类APOC2进化保守。本研究利用CRISPR/Cas9技术构建apoc2敲除斑马鱼模型，通过活体荧光成像和天然小分子库筛选，发现芍药苷通过调控HNF4A/PPARA/LDLR信号轴，为常规LPL依赖途径受损的严重HTG提供新型治疗机会。

³讨论

循环甘油三酯升高显著增加心血管疾病和急性胰腺炎风险。临床实践中贝特类药物是甘油三酯管理的一线疗法，但可能引起横纹肌溶解、肝损伤和血清肌酐水平升高等不良反应。现有贝特类药物开发时其具体作用机制尚未明确，后期研究证明其通过过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARA)发挥作用。Pemafibrate作为新一代降脂药，对PPARA表现出极高选择性，其临床研究显示对严重HTG患者具有显著降甘油三酯疗效，表明PPARA仍是HTG治疗和药物开发的重要靶点。