琥珀酸（Succinate）作为代谢相关脂肪肝病（MASLD）早期诊断标志物的性别特异性研究及其机制探索

　　本综述揭示琥珀酸（Succinate）在血液中的积累是代谢相关脂肪肝病（MASLD）的新型早期诊断标志物，尤其在雄性个体中表现显著。研究通过高脂饮食（HFD）小鼠模型和肝细胞培养实验，证实琥珀酸积累与线粒体功能障碍（mtH2O2超产）密切相关，而熊去氧胆酸（UDCA/TUDCA）干预可有效逆转该过程。该发现为MASLD的早期筛查（尤其儿科人群）提供了创新性策略。

　　

Highlights:

• 血浆琥珀酸水平与高脂饮食（HFD）诱导的MASLD进展呈强相关性

• 果糖 overload 诱导肝细胞琥珀酸外排，伴随线粒体功能损伤和H₂O₂超产

• UDCA/TUDCA处理通过保护线粒体功能抑制琥珀酸积累

• Glrx2^-/-雄性小鼠可抵抗琥珀酸、顺乌头酸和衣康酸的血浆积累

• 雌性小鼠对HFD诱导的MASLD及琥珀酸积累具有天然抗性

化学试剂：

丙烯酰胺溶液、过硫酸铵、Laemmli缓冲液和硝酸纤维素膜购自Bio-Rad。琥珀酸检测试剂盒购自Abcam。化学发光检测试剂、碘化丙啶（PI）、MTS检测试剂盒、琥珀酰赖氨酸抗体检测试剂盒和Amplex UltraRed（AUR）购自ThermoFisher。腺苷二磷酸（ADP）、FCCP、抗霉素A、牛血清白蛋白（BSA）、乙二醇双（β-氨基乙醚）-N,N,N′,N′-四乙酸（EGTA）等实验材料均用于支持本研究的技术流程。

血浆琥珀酸积累与HFD诱导的MASLD/MASH进展强烈相关：

饲喂HFD的6-8周龄雄性小鼠体重增加，但与对照组（CD）无显著差异（图1a）。腹部脂肪和肝脏质量显著增加，而心脏质量未变化（图1b）。肝组织HE和PAS-D染色显示，HFD喂养后细胞形态无改变且无巨噬细胞浸润迹象。然而，饲喂HFD 7周的小鼠出现明显肝纤维化（天狼星红染色阳性）和心脏纤维化（图1c）。血浆代谢组学分析显示，琥珀酸在2周HFD后升至50μM，7周后进一步升至100μM（图1d）。此外，乌头酸、衣康酸和乳酸也显著积累（图1e-g），而其他TCA循环中间物无变化。这些结果表明琥珀酸积累与MASLD进展密切同步。

讨论：

MASLD早期常无症状，难以通过常规血液指标（如ALT/AST）实现早期诊断。本研究证实琥珀酸可作为早期MASLD（尤其男性及儿科人群）的循环生物标志物。其积累机制涉及线粒体功能障碍、RET驱动mtH₂O₂超产以及GPR91信号激活。UDCA/TUDCA和Glrx2基因敲除实验证明，靶向线粒体功能可抑制琥珀酸溢出，这为MASLD治疗提供了新思路。