基于硫辛酸-两性霉素B-油酸-胆固醇纳米颗粒的新型抗真菌药物递送系统：降低细胞毒性并增强疗效的策略

　　本研究创新性地利用硫辛酸（Lipoate）纳米颗粒负载两性霉素B（AmB），通过引入油酸-胆固醇（Oleate-Chol）复合物形成新型四元纳米结构（100 nm）。该体系在保持卓越抗真菌活性的同时，显著降低药物细胞毒性，其负表面电荷特性赋予优异稳定性，为克服AmB临床应用瓶颈提供了突破性解决方案。

　　

章节亮点

引言

两性霉素B（AmB）是治疗严重系统性真菌病的关键抗真菌剂[1]。其作用机制涉及与真菌膜中麦角固醇结合，形成孔道导致必需物质外流，最终引起细胞死亡。由于主环上的羧基和霉唑胺环上的伯氨基（图1a）[2]，AmB仅在极端pH条件下具有水溶性。

材料

硫辛酸购自Todo Droga（阿根廷）。两性霉素B（AmB）由Química Luar S.R.L.（阿根廷）惠赠。安必素（Ambisome）和Amfostat（AFS）分别购自百时美施贵宝阿根廷公司和NORTHIA（阿根廷）。胆固醇和油酸分别购自Sigma-Aldrich和Pura Química（阿根廷）。所有细胞试剂均购自Invitrogen（阿根廷）。本研究使用的其他化学品和溶剂均为分析级。

硫辛酸-AmB纳米颗粒的制备

将10.32克硫辛酸溶于5.2% w/v（0.62 M）pH 8的碳酸氢钠溶液中，配制0.5 M的硫辛酸盐储备液。AmB储备液在避光且氮气密封条件下用二甲基亚砜（DMSO）配制，终浓度为32.5 mM（30 mg·mL^-1）。

AmB在硫辛酸纳米颗粒中的溶解：将AmB溶液缓慢加入不同稀释度的硫辛酸盐储备液中，最终AmB浓度为32.5 μM，硫辛酸盐浓度范围5-50 mM。混合物涡旋振荡后，在室温避光条件下孵育24小时。

硫辛酸纳米颗粒的表征

硫辛酸纳米颗粒通过在pH 8水溶液中直接溶解硫辛酸形成。通过动态光散射（DLS）观察发现，根据不同硫辛酸盐浓度（表1），会形成不同尺寸且具有高多分散指数的结构。5-10 mM硫辛酸盐浓度产生约150 nm的结构，而在25和50 mM浓度下则出现约50 nm的较小结构。

这些颗粒的Zeta电位分析显示...

讨论

两性霉素B（AmB）临床应用中面临的主要挑战包括：有限的胃肠道吸收、静脉给药难题、低水溶性和显著毒性。这些现状要求持续开发能改善并规避这些问题的替代制剂。本研究通过探究...

结论

本研究介绍了一种基于硫辛酸纳米颗粒（Lipoate NPs）的新型AmB纳米制剂，含或不含胆固醇-油酸盐复合物，均展现出理化稳定性、细胞毒性和抗真菌活性的显著改善。在硫辛酸-AmB制剂中加入胆固醇显著降低了体外细胞毒性，并增强了对白色念珠菌（C. albicans）的治疗效果，其疗效超越了安必素（Ambisome）等商业制剂。