新型MCL-1抑制剂MIK665在急性髓系白血病中的反应预测因子与理性联合治疗策略

　　本综述系统探讨了新型MCL-1抑制剂MIK665在急性髓系白血病（AML）中的疗效预测标志及联合治疗策略。研究发现ABC转运蛋白（ABCB1/MDR1）高表达与BCL-XL（BCL2L1）上调是MIK665耐药的关键机制，而分化标志物（LILRA2/IL17RA）则提示敏感性。通过联合ABCB1抑制剂（elacridar/tariquidar）或BCL-2抑制剂（venetoclax）可有效逆转耐药，尤其对原发性或获得性venetoclax耐药样本展现显著协同效应，为AML精准治疗提供新方向。

　　

3.1 原发性AML细胞对MIK665呈现差异化反应

通过对42例原发性AML样本进行多参数流式细胞术检测，发现MIK665的药物敏感性评分（DSS）呈连续分布（范围5.2-34.9）。根据DSS阈值将样本分为敏感组（DSS≥20，n=15）、耐药组（DSS≤10，n=10）和中间反应组（n=17）。值得注意的是，单核细胞分化群体（CD14⁺）对MIK665高度敏感（75%样本DSS≥20），而淋巴细胞群体则普遍耐药（96%样本DSS<20）。健康供体骨髓样本仅显示中等反应（DSS=10-12），表明MIK665对正常造血细胞影响有限。

3.2 ABCB1与BCL-XL高表达介导MIK665耐药机制

转录组分析揭示112个差异表达基因（FDR<0.1），其中ABCB1（编码MDR1/P-gp）在耐药样本中表达显著上调（log2FC=-3.54），其表达水平与DSS呈负相关（r=-0.5, P=0.00071）。同时，抗凋亡蛋白BCL-XL（BCL2L1编码）在耐药组中同步高表达（r=-0.4, P=0.0079），且与ABCB1表达呈正相关。Western blot验证了ABCB1和BCL-XL蛋白在耐药样本中的共同高表达现象，而BCL-2和MCL-1蛋白水平与耐药无显著关联。

3.3 分化标志物LILRA2与IL17RA预测敏感性

敏感样本中白细胞免疫球蛋白样受体A2（LILRA2）和白细胞介素17受体A（IL17RA）显著高表达，且与单核细胞分化标志物CD64（FCGR1A编码）表达正相关。根据FAB分型分析显示，M4/M5亚型（单核细胞分化）对MIK665敏感性显著高于M0/M1/M2亚型（未分化型），证实分化程度是影响MCL-1抑制剂疗效的重要特征。

3.4 AML细胞系依赖模式验证

DepMap数据库分析显示，高ABCB1表达的AML细胞系（n=45）呈现独特的BCL-2家族依赖特征：BCL2表达下调（P<0.01）、BCL2L1依赖增强（Chronos评分<-2.0），而MCL1依赖度降低。这表明ABCB1高表达细胞可能通过转换抗凋亡蛋白依赖模式（从MCL-1转向BCL-XL）逃逸细胞凋亡。

3.5 ABCB1表达具有耐药预测价值

ROC曲线分析证实ABCB1表达对耐药预测具有优异性能（AUC=0.856）。当以log2CPM=5.22为临界值时，其预测敏感性达80%，特异性达90.6%，阳性预测值为72.7%，表明ABCB1可作为MIK665治疗的负向生物标志物。

3.6 ABCB1抑制逆转耐药现象

使用第三代ABCB1抑制剂elacridar（500 nM固定浓度）与MIK665联用后，高ABCB1表达样本（n=7）的DSS显著提升（P<0.01），ZIP协同评分升高。同类抑制剂tariquidar也重现相同效果。但CRISPR-Cas9敲除ABCB1的HEL细胞系未出现敏感性提升，可能与该细胞系固有的BCL2L1高依赖特性（Chronos=-2.6）相关，说明ABCB1抑制需在MCL-1依赖背景下生效。

3.7 MIK665与venetoclax协同克服耐药

MIK665与BCL-2抑制剂venetoclax联用显著提升耐药样本（n=3）的DSS值（P<0.05）。值得注意的是，对venetoclax原发性耐药的样本（n=3）经联合治疗后同样显示显著协同效应（ZIP评分>10）。而BCL-XL抑制剂A1331852与MIK665联用仅在对venetoclax耐药样本中显现协同作用，提示不同耐药背景下的机制差异性。

3.8 联合策略克服获得性venetoclax耐药

通过浓度递增法构建获得性venetoclax耐药细胞系（MV4-11_VenR, Kasumi-1_VenR等）后发现，亲代细胞中MCL-1与BCL-2表达平衡被打破：BCL-2蛋白水平下降，BCL-XL和MCL-1表达呈上升趋势。MIK665与venetoclax联合在所有这些耐药细胞系中均产生高强度协同效应（ZIP评分>15），表明该策略可有效应对临床venetoclax治疗后复发 scenario。

讨论与结论

本研究系统阐释了AML中MCL-1抑制剂反应的异质性机制：①ABCB1介导的药物外排泵作用；②BCL-XL依赖性的适应性转换；③细胞分化状态的影响。联合抑制策略（ABCB1抑制剂或venetoclax）可有效逆转原发性及获得性耐药。特别值得注意的是，MIK665与venetoclax联用对venetoclax耐药样本仍具显著疗效，这为临床治疗失败患者提供了新选择。这些发现为MCL-1抑制剂的精准临床应用提供了分子分型依据和联合治疗策略，有望改善AML患者预后。