根尖周炎微生态差异研究：初发与继发根管感染的微生物组学比较分析及其临床意义

　　本研究针对初发与继发根管感染微生物群落差异这一临床难题，通过微生物培养与PCR技术对比分析139例患者的菌群特征。发现继发感染中Porphyromonas gingivalis(Pg)、Prevotella intermedia(Pi)和Dialister invisus显著富集，而初发感染以Klebsiella aerogens和Streptococcus为主。结果为靶向性根管消毒策略提供微生物学依据，对降低根管治疗失败率具有重要意义。

　　

在口腔疾病领域，根尖周炎是最常见的根尖周组织炎症性疾病，其发生发展与口腔病原微生物侵入坏死根管密切相关。尽管现代根管治疗成功率可达86%-98%，但仍有部分病例因微生物持续存在而导致治疗失败。传统观点认为初发感染以专性厌氧菌为主，而继发感染则多与粪肠球菌(Enterococcus faecalis)和白色念珠菌(Candida albicans)相关。然而，随着研究深入，学者们发现约50%的口腔微生物仍难以培养，许多未知病原体可能在感染持续中扮演重要角色。

针对这一临床挑战，印度SDM牙科学院的研究团队在《Journal of Oral Biology and Craniofacial Research》上发表了一项横断面研究，通过微生物培养和分子生物学技术对比分析了初发与继发根管感染的微生物群落差异。研究纳入了139例患者样本，其中74例为初发感染，65例为继发感染（再治疗病例）。研究人员采用需氧和厌氧培养技术对传统可培养微生物进行分离鉴定，同时运用聚合酶链反应(PCR)技术检测Dialister invisus、Olsenella uli和Synergistes oral clone BA121等难培养微生物。

关键技术方法包括：1）临床样本采集：通过无菌纸尖采集根管内容物，分别置于转运培养基（厌氧培养）和TE缓冲液（需氧培养和PCR）；2）微生物培养：使用血琼脂、布鲁氏菌琼脂、CVE琼脂等选择性培养基进行需氧和厌氧培养；3）分子鉴定：采用酚-氯仿法提取基因组DNA，通过特异性引物进行PCR扩增检测目标菌种。

研究结果方面：

厌氧菌培养结果显示：Porphyromonas gingivalis(Pg)(p=0.001)、Prevotella intermedia(Pi)(p=0.017)和Streptococcus(p=0.001)在继发感染中显著富集，而Aggregatibacter actinomycetemcomitans(Aa)、Fusobacterium nucleatum(Fn)和Lactobacillus(Lb)在两组间无显著差异。

需氧菌分析发现：23种需氧微生物中，Klebsiella aerogens(p=0.03)和Streptococcus(p=0.005)在初发感染中显著更常见。

PCR检测表明：Dialister invisus在继发感染中的检出率显著高于初发感染(68.2% vs 47.9%，p=0.024)，而Olsenella uli和Synergistes在两组间无统计学差异。

讨论部分指出，本研究首次对印度人群的初发与继发根管感染进行了难培养微生物的系统分析。研究发现继发感染具有更高的微生物多样性，其中Pg、Pi、Streptococcus和D. invisus的富集特征为临床鉴别诊断提供了微生物学依据。与传统认知不同，本研究未发现Aa和Fn在两组间的显著差异，这可能与地域、人群饮食习惯和公共卫生条件等因素有关。

结论强调，根管感染的微生物群落存在显著差异，这种差异对于制定靶向性治疗策略具有重要意义。针对继发感染中富集的Pg、Pi和D. invisus等病原体，可开发特异性消毒剂和治疗方法，从而提高根管治疗成功率。该研究为理解根管感染的微生物学基础提供了新视角，为个性化根管治疗方案的制定奠定了科学基础。