《Injury》：The efficiency of platelet-rich fibrin prepared under different centrifugation protocols on rat mental nerve regeneration
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轴突再生效果及免疫组化分析比较：采用30只雄性Wistar大鼠左侧精神神经损伤模型，分别施加空白对照、L-PRF包裹和A-PRF包裹处理，通过βIII-tubulin和S100B抗体免疫组化评估神经再生差异。结果显示A-PRF组βIII-tubulin免疫阳性强度显著高于L-PRF组（P<0.05），而S100B组间差异具有统计学意义（P=0.032）。两组均促进轴突再生，但A-PRF炎症反应控制更优。需延长观察周期验证长期疗效。
Bayram Fatih Efeo?lu|Nergiz Y?lmaz|Nihat La?in|Sel?uk Tunik
土耳其伊兹密尔私立牙科诊所
摘要
目的
通过免疫组化分析，比较白细胞和血小板富集纤维蛋白（L-PRF）与高级血小板富集纤维蛋白（A-PRF）对大鼠颏神经损伤再生的效果。
材料与方法
30只大鼠被随机分为三组：对照组、L-PRF组和A-PRF组。所有大鼠的左侧颏神经均被用于本研究。使用Ya?argil动脉瘤夹在损伤部位施加60秒的压力以诱导损伤。对照组中，受伤的颏神经自然愈合；第二组中，将L-PRF以膜形式包裹在损伤部位；第三组中，将A-PRF以膜形式应用于受伤的颏神经。
结果
从大鼠身上获取的神经样本使用beta III微管蛋白和S100 beta一抗进行免疫反应性检测。结果显示L-PRF组、A-PRF组和对照组之间存在显著差异。同样，当分析S100 beta一抗的免疫反应性时，也观察到三组之间存在显著差异。
结论
L-PRF和A-PRF在早期阶段均对轴突再生具有积极作用。为了进一步研究L-PRF和A-PRF在不同神经再生阶段的效果，需要开展更多的实验研究。
引言
神经损伤是口腔颌面外科手术中最常见的并发症之一[36]。这些损伤可能由多种因素引起，包括局部麻醉注射时对神经纤维的直接创伤、根管治疗过程中的化学物质渗透、用于矫正颌下颌畸形的骨切割器造成的创伤、拔除第三磨牙时的下颌骨折以及牙科种植体的植入。在颌面外科手术中，最常受影响的神经是下牙槽神经、颏神经和舌神经，它们都是三叉神经的终末分支[34,41]。虽然这类损伤通常不会危及生命，但可能导致严重的并发症，如功能障碍、外观问题及心理困扰[4]。
其中，颏神经损伤尤为常见，这与其解剖位置有关，且该神经靠近经常进行牙科和外科手术的区域，如种植体植入和下颌颏突区域的组织瓣设计[19,30]。颏神经损伤会显著干扰患者的日常活动，对其心理社会福祉和整体生活质量产生不利影响。有报告指出，2.95%的患者出现永久性神经损伤（如唇部感觉异常），1.7%的患者出现永久性神经功能障碍[18]。导致这些损伤的因素包括颏神经的前环结构以及种植体植入部位的过度准备，这可能导致神经管受压或神经束直接受损[33,48]。
尽管神经细胞具有一定的再生能力，但神经损伤后的功能恢复通常不充分[38]。成功的神经再生是一个复杂的过程，涉及多个阶段，包括轴突萌芽、生长、末梢器官的重新神经支配以及再生纤维与中枢神经系统的整合[3]。
目前有多种周围神经修复技术，包括显微外科、组织粘合剂、激光治疗、药物和生长因子。然而，近年来周围神经修复的外科治疗方法并未取得显著进展。尽管技术有所进步，但手术修复的功能效果仍然不尽如人意[43]。
神经再生依赖于生物活性分子信号与再生过程中涉及的细胞事件的协调[5]。神经营养因子和生长因子不仅支持神经细胞的存活，还能促进轴突生长[9]。周围神经再生的成功在很大程度上取决于细胞成分与修复过程中涉及的化学介质之间的相互作用[17]。
血小板富集纤维蛋白（PRF）是一种富含血小板和生长因子的再生制剂。研究表明，PRF通过促进血管生成、趋化作用、有丝分裂活性和干细胞增殖来加速早期骨骼再生。PRF也被称为白细胞-PRF或L-PRF[11,20]。
最近，研究人员开发了一种改进的L-PRF制备方案。该方法通过调整离心参数来增强组织再生效果：标准L-PRF以2700转/分钟的速度离心12分钟，而高级血小板富集纤维蛋白（A-PRF）则以较低速度（1500转/分钟）离心14分钟。这种调整增加了血小板数量并增强了单核细胞/巨噬细胞的活性[20,42]。
尽管许多研究证实了PRF对骨骼和伤口愈合的积极作用，但关于其在神经再生中的作用的研究仍较为有限[26,31,49]。然而，先前关于PRF在其他组织中的再生效应的研究表明，PRF也可能在神经恢复中发挥重要作用[2]。
目前，尚无针对口腔颌面区域常见神经损伤的标准治疗方案。因此，需要新的方法来有效解决这一严重的临床问题。我们的假设是，由于含有生长因子，L-PRF和A-PRF在促进神经再生方面更为有效。
本研究的目的是通过组织学方法评估不同离心方案制备的PRF对颏神经损伤治疗效果的影响。
研究设计
这项动物实验在埃杰大学动物实验伦理委员会（协议编号：2017-TDR-SABE-0039）的批准下进行，并得到了伊兹密尔Katip ?elebi大学科学研究项目协调单位的支持。所有操作均遵循了实验室动物伦理使用和护理的机构指南和规定。
共有30只健康的雄性Wistar Albino大鼠（年龄：3个月，体重约200克）被随机分为三组
免疫组化结果
在免疫组化分析中，检测了样本对beta III微管蛋白和S100B一抗的免疫反应性。评分标准为每个视野内的阳性细胞数量，免疫反应性分为阴性（0分）、弱阳性（1分）和中阳性（2分）或强阳性（3分）。
对照组样本对beta III微管蛋白抗体的免疫反应性较弱，平均染色得分为1分；而对S100B抗体的免疫反应性为中等到强阳性，平均染色得分为2.6分。
讨论
本研究的免疫组化结果显示，与L-PRF组相比，对照组和A-PRF组的S100B抗体染色更强。这些结果表明，接受L-PRF治疗的神经在4周时的S100B表达水平较低。L-PRF组中S100B表达水平显著低于其他两组，表明其炎症反应和水肿较轻，处于持续的愈合阶段，处于再生状态。
两种外科方法
声明
资金信息：本研究由伊兹密尔Katip ?elebi大学科学研究协调单位资助（项目编号：2017-TDR-SABE-0039）
数据获取
本研究使用和/或分析的数据集可应要求向相应作者索取。
声明：本研究由伊兹密尔Katip ?elebi大学科学研究协调单位资助（项目编号：2017-TDR-SABE-0039）
CRediT作者贡献声明
Bayram Fatih Efeo?lu：软件开发、方法设计、资金获取、数据分析、数据管理。Nergiz Y?lmaz：撰写——审稿与编辑、初稿撰写、验证、监督、方法设计、资金获取、数据管理。Nihat La?in：监督、方法设计、数据分析。Sel?uk Tunik：监督、软件使用、数据管理。
