V-ATPase B介导Bt Cry1Ac与梨小食心虫结合及其毒性机制研究

　　本研究发现梨小食心虫（Grapholita molesta）中肠围食膜蛋白V-ATPase B可与Bt毒素Cry1Ac特异性结合，并通过体内外实验证实其显著增强毒素毒性。该研究为开发靶向中肠蛋白的新型生物农药提供了重要理论依据，对害虫抗性治理具有指导意义。

　　

Highlight

昆虫与细胞系

梨小食心虫（Grapholita molesta）由西北农林科技大学害虫防治实验室饲养。幼虫饲喂人工饲料，成虫提供蜂蜜水溶液。昆虫在光照强度4800 lx、温度26±0.5°C、相对湿度70±10%、光周期15L:9D的人工气候箱中培养（Lv等，2024；Feng等，2025）。

草地贪夜蛾（Spodoptera frugiperda）卵母细胞（Sf9）由华中师范大学 generously 提供。

检测GmolV-ATPase B蛋白与活化Cry1Ac在梨小食心虫围食膜（PM）中的结合

基于梨小食心虫PM蛋白的SDS-PAGE凝胶和配体印迹结果，我们发现一个48-63 kDa的蛋白条带能够与活化Cry1Ac毒素结合，推测该范围内存在潜在的Cry1Ac结合蛋白（图1）。目标条带被切下并进行LC-MS/MS分析，鉴定出25个候选蛋白（表S2）。通过整合梨小食心虫基因组和中肠转录组数据，我们进一步推断...

讨论

在鳞翅目昆虫中，已发现多种蛋白可与Cry1A毒素结合，包括氨肽酶-N（APN）、钙粘蛋白（CAD）、碱性磷酸酶（ALP）、ATP结合盒转运蛋白（ABC transporters）和液泡ATP酶（V-ATPase）（Chen等，2009；Hua等，2014；Zú?iga-Navarrete等，2013；Xiao等，2014；Xu等，2013；McNall等，2003）。V-ATPase是一个多亚基复合物，在昆虫多种生理过程中为能量供给发挥关键作用...