hsa-miR-21-5p作为透明细胞肾细胞癌的生物标志物：通过促进肿瘤进展和免疫逃逸影响预后与治疗反应

　　本研究聚焦于透明细胞肾细胞癌（ccRCC）中hsa-miR-21-5p的致癌作用机制及临床意义。研究人员通过生物信息学分析、临床验证实验及功能富集研究，发现hsa-miR-21-5p的高表达与患者不良预后显著相关，并促进肿瘤进展和免疫逃逸。该分子通过调控钙离子转运、基底膜功能及JAK-STAT、cGMP-PKG等信号通路，影响肿瘤微环境并降低免疫治疗响应，同时增加对阿西替尼、舒尼替尼等靶向药物的敏感性。该研究为ccRCC的分子分型、预后评估及联合治疗策略提供了重要理论依据。

　　

肾细胞癌（Renal Cell Carcinoma, RCC）是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一，其中透明细胞肾细胞癌（clear cell renal cell carcinoma, ccRCC）占其病例的80%–90%。近年来，ccRCC的发病率持续上升，已成为北美地区增长最快的癌症类型之一。晚期和转移性ccRCC患者的5年生存率极低，且对标准化疗和放疗反应有限。尽管手术、免疫抑制药物和靶向药物治疗是主要治疗手段，但术后复发和转移仍是重大临床挑战。尤其是靶向治疗虽然可延长无进展生存期，但长期使用易导致耐药性。因此，探寻新的生物标志物和治疗靶点，揭示ccRCC发生发展的分子机制，已成为当前研究的重点。

微RNA（microRNAs, miRNAs）作为一类短链非编码RNA，在基因表达调控中扮演重要角色，其表达异常与多种肿瘤的发生、进展及耐药性密切相关。其中，hsa-miR-21-5p作为一个在多种癌症中高表达且功能重要的分子，已被报道在乳腺癌、肝癌和胃癌等多种恶性肿瘤中起到促癌作用。然而，其在ccRCC中的具体功能、调控机制及临床应用潜力尚不明确。为此，Xu等人在《Discover Oncology》发表了一项系统研究，揭示了hsa-miR-21-5p在ccRCC肿瘤进展、免疫微环境调控及治疗响应中的多重作用。

该研究运用了多种关键技术方法，主要包括：基于TCGA数据库的转录组与临床数据挖掘；差异表达分析与生存建模；qPCR实验验证miRNA及其靶基因表达；TargetScanHuman数据库进行靶基因预测；GO、KEGG和GSEA功能富集分析；肿瘤微环境评分与免疫细胞浸润计算；以及药物敏感性分析。样本来源于公共数据库和临床组织验证队列。

研究结果包括以下几个方面：

3.1 Differential miRNA selection

通过差异表达分析筛选出在ccRCC中显著上调的miRNA，其中hsa-miR-21-5p表达在肿瘤组织中明显高于正常组织，且其高表达与患者不良预后密切相关。

3.2 Differential gene analysis and validation

进一步验证显示，hsa-miR-21-5p在ccRCC组织中的表达显著高于癌旁组织。生存分析表明，高表达组患者总生存期显著缩短。单因素与多因素Cox分析均证实其作为独立预后因子的价值。

3.5 Statistical analysis of clinical data

hsa-miR-21-5p的高表达与肿瘤分级、分期以及M期、N期显著相关，表明其表达水平与ccRCC恶性进展密切相关。

3.6 Predicting miRNA target genes

利用TargetScan预测发现，hsa-miR-21-5p可能靶向调控YOD1等多个基因，这些基因参与细胞凋亡、信号转导等重要生物学过程。

3.7 Coexpression analysis

共表达分析显示，hsa-miR-21-5p与多个靶基因呈负相关关系，进一步证实其通过抑制靶基因表达促进肿瘤发展。

3.8 GO enrichment analysis

GO分析提示，hsa-miR-21-5p可能通过调节钙离子运输、基底膜组成以及mRNA调控元件结合等分子功能，影响ccRCC的生物学行为。

3.9 KEGG enrichment analysis

KEGG通路分析显示，hsa-miR-21-5p可能通过JAK-STAT、cGMP-PKG、磷脂等信号通路参与肿瘤发生与免疫调节。

3.10 Gene set enrichment analysis

GSEA分析表明，低表达hsa-miR-21-5p的样本在脂肪酸代谢、氧化磷酸化等代谢通路中富集，而高表达样本则显著富集于免疫相关通路如吞噬体识别、抗原结合等，提示其可能通过代谢重编程和免疫调节双重机制促进肿瘤进展。

3.11 Tumour microenvironment analysis and differential analysis

肿瘤微环境分析显示，hsa-miR-21-5p高表达组的基质评分、免疫评分及综合评分均较高，表明其与肿瘤纯度低、免疫细胞浸润增多相关。

3.12 Immune cell infiltration, correlation, and therapeutic analysis

免疫浸润分析发现，hsa-miR-21-5p与M0巨噬细胞、调节性T细胞等免疫抑制性细胞呈正相关，而与树突状细胞、NK细胞等免疫效应细胞负相关。高表达组患者对免疫治疗响应较差，提示其可能促进免疫逃逸。

3.13 Drug sensitivity and sensitivity differential analysis

药物敏感性分析显示，hsa-miR-21-5p高表达患者对阿西替尼（axitinib）、舒尼替尼（sunitinib）、卡博替尼（cabozantinib）等靶向药物更具敏感性，为临床用药选择提供了依据。

3.14 Validation of the predicted target genes

通过qPCR实验验证了hsa-miR-21-5p的潜在靶基因，包括YOD1、KRIT1等，这些基因在肿瘤组织中表达显著差异，进一步支持了生物信息学预测结果。

综上所述，该研究系统揭示了hsa-miR-21-5p在ccRCC中作为致癌miRNA的多重功能：其高表达不仅与肿瘤恶性进展和患者预后不良密切相关，还通过调控靶基因表达、影响关键信号通路、重塑肿瘤代谢微环境以及促进免疫逃逸，显著影响临床治疗响应。此外，该研究还发现hsa-miR-21-5p高表达患者对部分靶向药物更为敏感，这为未来开发针对miRNA的个体化治疗策略提供了重要线索。这些发现不仅深化了对ccRCC分子机制的理解，也为该疾病的生物标志物研究和治疗选择提供了新的方向。