梅毒螺旋体tpp47 DNA在唾液、血清及脑脊液中的差异检测及其传播意义

　　本研究针对梅毒不同分期患者开展多样本（唾液、血清、脑脊液）TP-DNA检测，采用巢式PCR(nPCR)靶向tpp47基因。结果显示二期梅毒唾液检测率高达40.0%，显著高于血清(3.4%)与脑脊液(7.1%)，提示唾液可能成为梅毒传播新途径，为非侵入性诊断和公共卫生防控提供重要依据。

　　

梅毒是由苍白螺旋体（Treponema pallidum）引起的经典性传播疾病，至今仍在全球范围内造成严峻的公共卫生挑战。据世界卫生组织报告，2020年全球新发感染病例高达710万，尤其在非洲地区负担沉重。近年来，其发病率不降反升，使得开发有效的早期诊断和治疗方法变得尤为迫切。

传统的梅毒诊断严重依赖血清学检测和暗视野显微镜检查。然而，这两种方法各有其局限性：血清学检测在感染后的窗口期可能出现假阴性，而治愈后抗体长期存在又可能导致假阳性；暗视野显微镜则对操作者的技术和设备有很高要求，且并不适用于所有类型的临床样本。由于梅毒螺旋体无法在常规培养基上培养，科学家们将目光投向了分子生物学技术。核酸扩增检测（NAATs）技术，以其高灵敏度和特异性，成为检测病原体特异性基因片段的有力工具，其中巢式PCR（nPCR）技术因比常规PCR具有更高的灵敏度和特异性而备受青睐。

在此背景下，孟勇军等人的研究团队开展了一项深入研究，旨在探索梅毒螺旋体DNA在患者不同临床样本（唾液、血清和脑脊液）中的存在情况，及其与不同疾病分期的关系。他们的研究成果发表在《European Journal of Medical Research》上，为理解梅毒传播风险和优化诊断策略提供了新的重要证据。

为了开展这项研究，研究人员主要应用了几个关键技术方法：首先，他们从2020年至2024年间，在广西医科大学第一附属医院收集了一个包含740名确诊梅毒患者的临床样本队列，样本类型包括唾液、血清和脑脊液(CSF)。其次，他们采用巢式PCR(nPCR)这一核心技术，针对梅毒螺旋体的tpp47基因（GenBank: QCQ80232.1）设计特异性引物进行DNA扩增和检测。最后，运用统计学方法（如卡方检验、Fisher精确检验和二元逻辑回归分析）对检测结果进行了比较和影响因素分析。

比较不同分期梅毒患者各类临床样本中梅毒螺旋体DNA的检出率

研究人员共收集了来自740名患者的1023份样本。分析结果显示，梅毒螺旋体DNA在唾液中的总体检出率（13.6%, 36/264）显著高于在血清（3.1%, 17/543）和脑脊液（5.5%, 12/216）中的检出率。其中，二期梅毒患者的唾液检出率尤为突出，高达40.0% (26/65)，显著高于其他分期，并且其唾液和脑脊液的检出率也显著高于自身血清的检出率。然而，在原发性梅毒、神经梅毒和潜伏梅毒患者中，三种样本的检出率则无显著差异。这一结果表明，二期梅毒患者的唾液中含有更丰富的病原体DNA。

同一患者不同临床样本中梅毒螺旋体DNA的检测

研究还对比了来自同一患者的配对样本。在128对唾液-血清样本、106对唾液-脑脊液样本和120对血清-脑脊液样本，以及71组同时包含三种样本的检测中，唾液与脑脊液之间、以及血清与脑脊液之间的检测结果表现出一定的一致性。然而，在唾液与血清之间，以及所有三种样本之间，均未观察到一致性。这提示不同样本中病原体的分布可能是独立的。

对梅毒患者不同临床样本中梅毒螺旋体DNA阳性影响因素的分析

通过二元逻辑回归分析，研究人员探讨了影响检测阳性的因素。分析表明，年龄和血清TRUST（甲苯胺红不加热血清试验）滴度（≥1:32）对三种样本的阳性率均无显著影响。原发性和潜伏梅毒对唾液DNA阳性率的影响也很小。然而，二期梅毒是导致唾液DNA检测阳性的最主要因素，贡献了70.3%的阳性病例。此外，潜伏梅毒与较高的血清DNA阳性率显著相关，而HIV感染则显著影响了唾液的DNA阳性率。

研究的结论与讨论部分深刻阐释了这些发现的重要意义。本研究有力地证实，在梅毒患者的各类临床样本中，唾液是检出梅毒螺旋体DNA率最高的样本类型，尤其是在传染性最强的二期梅毒阶段。这强烈提示唾液可能是一个先前未被充分认识的传播途径，通过接吻、共餐等日常亲密接触行为传播梅毒的风险是真实存在的，这改变了人们通常认为梅毒仅通过性接触传播的认知。

与以往研究相比，本研究采用单靶点(tpp47) nPCR的检出率虽低于使用多靶点(tpp47/polA)数字PCR(ddPCR)的研究，但这揭示了检测策略和样本选择（如是否包含有口腔病损的患者）对结果的影响，指明了未来采用多靶点、定量PCR方法进行研究的方向。

此外，在血清和脑脊液中检测到DNA，尤其是潜伏梅毒患者血清中的阳性结果，表明即便在没有明显症状的阶段，患者体内仍可能存在活菌并具有潜在传播性，这对梅毒的流行病学防控和治疗随访提出了新要求。

综上所述，这项研究不仅为梅毒的病原学诊断提供了一个高效、非侵入性的样本选择——唾液，尤其适用于二期梅毒的诊断和监测，更重要的是，它揭示了唾液可能作为梅毒传播的重要媒介，对公共卫生防控策略具有深远影响。它提醒临床医生和公共卫生部门，在梅毒的诊断、咨询和防控中，需要充分考虑非性接触传播的风险。未来的研究可进一步探索唾液中的病原体载量与传染性之间的定量关系，以及开发基于唾液的无创、高灵敏度检测技术。