BLNK在慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征中的表达调控网络及其通过钙信号通路介导炎症机制的研究

　　本研究针对慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征（CP/CPPS）的炎症调控机制，首次揭示了B细胞连接蛋白（BLNK）在动物模型、细胞模型及临床样本中的表达规律与功能。通过多组学分析发现BLNK沉默可抑制炎症因子（IL-1β、IL-6、IL-8）表达并影响细胞增殖周期，其作用与钙信号通路及LINC02518密切相关，为CP/CPPS治疗提供了新靶点。

　　

慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征（CP/CPPS）是困扰男性泌尿系统健康的常见疾病，约占所有前列腺炎病例的90%以上。患者不仅遭受疼痛困扰，还常伴有免疫功能紊乱和炎症因子异常表达。尽管已知白细胞介素（如IL-1β、IL-6、IL-8）在疾病进程中起关键作用，但其深层调控机制仍未明确，缺乏有效治疗靶点。近年来，B细胞受体（BCR）信号通路在炎症疾病中的作用逐渐受到关注，其中B细胞连接蛋白（BLNK）作为该通路的核心适配蛋白，在细胞信号转导、增殖调控和炎症反应中具有重要功能，但其在CP/CPPS中的具体角色尚未被探索。

为揭示BLNK在CP/CPPS中的作用机制，研究人员开展了一项跨物种、多层次的系统研究。该成果发表于《Inflammation》期刊，首次构建了BLNK在CP/CPPS中的表达调控网络，为临床治疗提供了新的理论依据。

本研究主要采用以下关键技术方法：通过大鼠CP/CPPS模型（使用角叉菜胶诱导）与LPS刺激的人前列腺上皮细胞（RWPE-1）构建体外炎症模型；利用RNA测序（RNA-seq）进行转录组分析；使用qPCR、Western blot（WB）和免疫组化（IHC）检测基因与蛋白表达；通过慢病毒转染实现BLNK基因沉默；采用流式细胞术分析细胞周期与凋亡；借助生物信息学工具进行GO/KEGG富集分析、lncRNA-mRNA共表达网络构建及分子对接验证；临床样本来源于桂林医科大学附属医院门诊患者的 expressed prostatic secretion（EPS，前列腺液）。

研究结果主要包括以下方面：

Establishment of CP/CPPS rat model

通过角叉菜胶注射成功建立CP/CPPS大鼠模型，HE染色显示模型组前列腺腺泡结构破坏、血管增生、大量淋巴细胞浸润及组织水肿，证实造模成功。

Global profile of DE-mRNAs in CP/CPPS rat model

RNA-seq分析鉴定出947个上调mRNA和128个下调mRNA。KEGG富集显示BCR信号通路显著富集，其中BLNK等7个关键基因表达显著上升，经qPCR验证与测序结果一致。

BCR signaling pathway is involved in the inflammatory process of CP/CPPS

BCR信号通路与CP/CPPS炎症过程密切相关，7个差异基因均在该通路中显著上调。

The expression and secretion of BLNK were up-regulated in LPS-induced RWPE-1 Cells

在LPS诱导的人前列腺炎细胞模型中，BLNK在mRNA和蛋白水平均显著高表达；临床样本分析显示CP/CPPS患者前列腺液中BLNK蛋白水平也明显升高。

BLNK silencing can inhibit the inflammatory process of LPS-induced RWPE-1 Cells

沉默BLNK后，炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8表达显著抑制；Edu染色和流式细胞术显示细胞增殖受阻、凋亡增加、S期细胞周期停滞。

Global profile of DE-mRNAs and DE-LncRNAs after BLNK silencing

BLNK沉默后筛选出730个差异lncRNA和563个差异mRNA，富集分析显示它们显著参与钙信号通路等炎症相关过程。

The effect of BLNK on CP/CPPS may be achieved through calcium signaling pathway

分子对接表明BLNK与EDNRB、FGF1、FGF2、F2R等蛋白具有高结合活性；lncRNA-mRNA共表达网络分析发现LINC02518可同时靶向这四个基因，且其表达在BLNK沉默后显著下降。

研究结论表明，BLNK在CP/CPPS的发生与发展中起到关键作用。其在炎症组织、细胞模型及患者前列腺液中均高表达，沉默BLNK可抑制细胞增殖、促进凋亡、减少炎症因子释放。机制上，BLNK可能通过钙信号通路调控CP/CPPS进程，并与长链非编码RNA LINC02518密切相关。该研究不仅为CP/CPPS的分子机制提供了新见解，也为开发以BLNK为靶点的治疗策略奠定了理论基础，具有重要的临床转化价值。