新型rMEVlhA-MS2/28多表位蛋白的设计及其在鸡滑液囊支原体间接ELISA检测中的应用研究

　　本研究针对鸡滑液囊支原体（Mycoplasma synoviae）诊断需求，开发了基于vlhA和MS2/28蛋白线性B细胞表位的嵌合多表位蛋白rMEVlhA-MS2/28。通过原核表达系统成功获得可溶性重组蛋白（产量71mg/L），并建立间接ELISA方法。经163份临床血清验证，该方法具备高灵敏度与特异性，为MS流行病学监测和快速诊断提供了新型可靠工具。

　　

为应对鸡滑液囊支原体（Mycoplasma synoviae, MS）引发的全球性家禽疾病及经济损失，研究人员聚焦于其关键膜免疫原——相变血凝素（phase-variable haemagglutinin）。本研究通过精准筛选vlhA与MS2/28蛋白中的特异性线性B细胞表位，构建了一种嵌合多表位蛋白rMEVlhA-MS2/28。利用大肠杆菌（E.coli）BL21-DE3菌株实现重组蛋白的可溶性表达，并通过亲和纯化技术从每升细菌培养物中高效获得71毫克蛋白产物。

基于该蛋白开发的间接rMEVlhA-MS2/28-ELISA检测方法，在评估过程中使用了来自兽医机构、诊断实验室及RAZI研究所家禽疾病部门的163份鸡血清样本（包括阳性、阴性和疫苗接种组）。结果表明，该蛋白的强特异性源于表位的精准选择及vlhA蛋白中G相关白蛋白结合模块（Albumin-binding module）的去除。此技术为MS抗体检测提供了便捷、敏感且高特异性的诊断方案，不仅支持快速临床诊断，更适用于大规模流行病学调查。该嵌合蛋白在特异性抗体检测方面展现显著潜力，为改进现有检测方法提供了新策略。