EP300/YAP1-SERPINE1信号轴调控胆道闭锁肝纤维化的机制与治疗潜力

　　本研究针对胆道闭锁（BA）中胆管反应（DR）和肝纤维化（LF）的机制不明确问题，研究人员聚焦YAP1及其下游通路开展深入探索。通过多组学分析与功能实验，发现EP300作为共激活因子协助YAP1/TEAD转录调控SERPINE1表达，进而驱动LF进程。抑制EP300可显著改善胆管细胞屏障功能并减轻纤维化，为BA患者提供了潜在治疗策略。

　　

胆道闭锁（Biliary Atresia, BA）是婴儿期最常见的胆汁淤积性肝病，以进行性肝纤维化（Liver Fibrosis, LF）和胆管反应（Ductular Reaction, DR）为主要特征，目前缺乏有效治疗手段，最终多数患者需要肝移植。尽管临床观察发现BA患者存在胆管细胞异常增殖与活化，但其驱动LF的具体分子机制仍不明确，这严重阻碍了靶向药物的开发。

为揭示BA中LF的发病机制，Zhongxian Zhu等研究人员从胆管细胞内部分子信号出发，深入研究了细胞间相互作用导致纤维化的调控通路。该研究发表于《CHEST》杂志，不仅阐明了关键信号轴的作用机制，还为临床干预提供了新的思路。

研究团队综合运用了多种前沿技术方法，主要包括：利用BA患者肝组织样本及恒河猴轮状病毒（Rhesus Rotavirus, RRV）感染的小鼠模型进行体内实验；采用类器官培养技术构建人源及鼠源胆管细胞类器官（Cholangiocyte Organoids, COs）模拟病理过程；通过ATAC-seq（Assay for Transposase-Accessible Chromatin with high-throughput sequencing）和RNA-seq（RNA sequencing）进行多组学整合分析；运用免疫沉淀-质谱、共免疫沉淀、染色质免疫沉淀、CUT&RUN（Cleavage Under Targets and Release Using Nuclease）及双荧光素酶报告基因实验等分子生物学技术探索转录调控机制。

Results

YAP1在胆管细胞中上调并促进细胞增殖与肝星状细胞活化

研究发现在部分BA患者中，Hippo通路关键效应因子YAP1（Yes-associated protein 1）在胆管细胞中显著高表达。体外细胞模型证实，YAP1激活不仅能促进胆管细胞增殖，还可间接激活肝星状细胞（Hepatic Stellate Cells, HSCs），后者是肝纤维化的主要效应细胞。

SERPINE1被鉴定为YAP1的下游靶基因

通过对RRV感染的胆管细胞类器官进行ATAC-seq和RNA-seq分析，研究团队发现纤溶酶原激活物抑制剂1（SERPINE1）在染色质可及性和基因表达水平均显著升高，且其表达受YAP1直接调控，提示SERPINE1可能是诱导纤维化的重要介质。

EP300作为共激活因子协助YAP1/TEAD复合物转录调控SERPINE1

机制研究表明，组蛋白乙酰转移酶EP300作为YAP1的转录共激活因子，与YAP1/TEAD转录复合物共同结合于SERPINE1启动子区域，直接增强其转录活性。分子互作实验证实了YAP1–EP300–TEAD多元复合物的形成及其对SERPINE1表达的推动作用。

抑制EP300显著减轻纤维化并改善胆管细胞功能

在RRV诱导的BA小鼠模型中，药理抑制EP300可明显减少胆管反应和肝纤维化，同时增强胆管细胞类器官的屏障通透性和连接完整性。在BA患者来源及RRV小鼠来源的类器官中同样验证了EP300抑制剂的治疗效果，表明其具有跨物种的潜在应用价值。

Conclusion and Discussion

本研究首次揭示EP300/YAP1-SERPINE1信号轴在胆道闭锁相关肝纤维化中的核心作用。YAP1通过招募EP300作为共激活因子，上调SERPINE1表达，从而驱动胆管反应和肝星状细胞活化，最终导致肝纤维化。值得注意的是，靶向抑制EP300不仅能阻断这一致病通路，还可显著改善胆管细胞功能，这为BA患者提供了一种非手术干预的治疗方向。

该研究的重大意义在于将基础分子机制与临床转化潜力紧密结合：一方面阐明了BA中纤维化发生的新机制，另一方面通过类器官模型和小鼠实验验证了EP300作为治疗靶点的可行性，为开发表观遗传药物治疗胆道闭锁奠定了坚实理论基础。