2-羟基查尔酮的双靶点抗淋球菌机制研究：延伸因子Tu与丁二醇脱氢酶的新型抑制作用

　　本研究首次揭示植物提取物2-羟基查尔酮（2-HC）通过双重靶向机制（延伸因子EF-Tu与丁二醇脱氢酶Bdh）发挥抗耐药淋球菌作用，其与EF-Tu结合常数（KD）达1.28μM，可扰乱NAD+/NADH平衡，为开发窄谱抗淋球菌药物提供了新策略。

　　

关键发现

中国杨树蜂胶（CPP）提取物显示出最强的抗淋球菌活性。其中高良姜素被鉴定为CPP中最活跃的化合物，但在小鼠感染模型中未显示体内活性。通过筛选高良姜素的结构类似物，最终发现2-羟基查尔酮（2-HC）的最小抑菌浓度（MIC）为8-16μM，并在感染模型中显著增强淋球菌清除效果。Pull-down实验鉴定出延伸因子EF-Tu和丁二醇脱氢酶（Bdh）作为2-HC的潜在作用靶点。结合分析显示2-HC与重组纯化蛋白的结合解离常数（K_D）分别为EF-Tu 1.28μM和Bdh 5.97μM。分子对接研究进一步揭示2-HC与EF-Tu的Glu260残基及Bdh的Ser273残基结合，该结果通过突变实验得到验证。针对Bdh，研究还证实2-HC可抑制其酶活性（IC₅₀为44-64μM），导致NAD⁺/NADH比率紊乱。

研究意义

2-HC展现出双模式抗淋球菌机制，使其成为进一步开发抗淋球菌疗法的候选化合物。

讨论

当前淋球菌治疗指南推荐头孢曲松单药或头孢曲松联合阿奇霉素双疗法。但随着FC428克隆及其penA等位基因60.001的全球传播，高水平头孢曲松耐药和阿奇霉素耐药菌株日益增多。植物提取物指导的抗菌剂发现策略表明，2-HC通过独特双靶点机制（EF-Tu和Bdh）发挥作用，其中对Bdh的抑制导致NAD⁺再生受阻，这为开发针对耐药淋球菌的窄谱药物提供了新方向。

结论

本研究证实2-HC和CPP提取物具有体外和体内抗淋球菌活性。2-HC的分子靶点被确定为EF-Tu和Bdh，通过抑制Bdh活性扰乱NAD⁺再生过程。这些结果突显了植物产品可作为开发替代抗菌剂和发现新抗菌靶点的重要资源。