突破单次给药局限：新型多次给药设计实现稳态评估并缩短人体质量平衡研究受试者隔离时间

　　本综述提出一种创新性多次[14C]微示踪剂量设计方案，通过大鼠概念验证实验证明其可替代传统单次给药模式，有效缩短人体质量平衡研究（hADME）受试者隔离时间，实现真实稳态条件下循环代谢产物谱与清除通路的精准评估，显著提升临床研究可操作性与数据转化价值。

　　

Highlight

传统单次给药质量平衡研究存在受试者隔离时间长、无法真实反映稳态条件的局限性。本研究通过多次[¹⁴C]微示踪剂量设计，在大鼠实验中成功实现单日样本采集即可获得完整排泄物代谢数据，为人体研究提供创新解决方案。

动物实验设计

斯普拉格-杜利大鼠分为单次给药组（SD）和多次给药组（MD），每组3只。SD组接受单次口服[¹⁴C]GDC-0334（100 mg/kg，放射性剂量65 μCi/kg）；MD组连续7天每日给药相同剂量。基于4周毒性研究中300 mg/kg的无观察不良反应水平（NOAEL），该剂量设计符合安全标准。

数学框架

数学模型中，单次给药研究中第1至n天排泄物内药物相关物质总量等于逐日排泄量的累加（a+b+c+...+x%剂量）。在多次给药研究中，假设每日给药且ADME特性不变，第n天单日采集的样本即等同于单次给药第1至n天混合样本的总排泄量。

质量平衡回收率与对比

研究首先验证排泄物分析的稳态理论。选用半衰期短（4小时）、5天内完全清除的[¹⁴C]GDC-0334作为模型化合物。大鼠实验显示：多次给药组第7天单日采集的排泄物放射性回收率（102.3%）与单次给药组5天累计回收率（100.6%）高度一致，粪便为主要排泄途径（>90%剂量）。

讨论

代谢物鉴定与安全性测试（MIST）和药物相互作用（DDI）预测需基于稳态条件下的代谢谱与清除通路数据。2014-2018年FDA批准药物中仅3%开展稳态hADME研究。传统单次给药研究虽数学模型成立，却存在转化局限性——尤其对呈现时间依赖性药代动力学（PK）的分子而言，其ADME特性在多次给药后可能发生改变，导致单次给药数据无法反映真实临床场景。本研究提出的多次微示踪剂量方案通过极低放射性剂量（<1 μCi）实现稳态评估，大幅降低受试者负担，为患者人群研究提供可行性路径。