富含acemannan的芦荟多糖J2通过抑制自噬流保护视网膜色素上皮细胞抵抗UVA诱导的光损伤

　　本研究首次发现高纯度芦荟多糖ACJ2（含90%高分子量acemannan）能显著抑制UVA诱导的视网膜色素上皮细胞自噬性死亡。其通过降低线粒体ROS水平、抑制MAPKs（p38/ERK1/2/JNK）磷酸化通路、下调促炎因子（TNF-α/IL-1β/iNOS）表达，同时增强HO-1活性和维持线粒体DNA稳定性，为年龄相关性黄斑变性（AMD）治疗提供了新型天然产物候选方案。

　　

Highlight

Isolation and purification of Aloe polysaccharides ACJ2

芦荟多糖ACJ2的分离纯化依据美国专利2022/0072080 A1方法进行：将干燥芦荟粉（200倍浓缩物）与去离子水混合过滤后，采用非极性树脂（HP-20 DIAION?）进行柱色谱分离，以1L/min流速进行乙醇-水梯度洗脱（0-100%），获得三个主要组分：100%水相组分、50%乙醇组分和100%乙醇组分。ACJ2取自100%水洗脱部分，经冷冻干燥后获得纯品。

Quantification of acemannan and O-acetyl content in ACJ2

通过高效液相色谱（HPLC）和紫外可见分光光度法分别测定ACJ2中acemannan和O-乙酰基含量（图1）。HPSEC分析显示ACJ2保留时间为13.8分钟，acemannan含量达98.1±1.1%。O-乙酰基含量为775.63 mg/g（77.56%），显著高于普通芦荟提取物。

Characterization of ACJ2

采用配备折射率检测器的HPSEC测定ACJ2平均分子量为1.89×10⁶ Da。FT-IR光谱在1730 cm^-1处显示典型O-乙酰基特征吸收峰，¹H NMR谱在δ 2.16 ppm处出现乙酰基质子信号，证实其高分子量特性与高乙酰化修饰。

Conclusion

本研究有力证实了富含acemannan的高纯度芦荟多糖ACJ2在UVA诱导的AMD细胞模型中的治疗潜力。ACJ2通过降低线粒体ROS水平、维持线粒体能量稳态，有效保护RPE细胞免受氧化应激损伤。它通过抑制MAPK通路磷酸化，显著抑制促炎细胞因子和iNOS表达，同时增强HO-1抗氧化酶活性。值得注意的是，ACJ2能抑制p62消耗和LC3-I/II转换，表明其通过调控自噬流发挥细胞保护作用。