Sofalcone通过激活Keap1/Nrf2信号通路抑制破骨细胞生成并改善卵巢切除诱导的骨流失

　　本研究发现中药来源的酚类化合物Sofalcone通过激活Keap1/Nrf2信号通路，显著抑制RANKL诱导的破骨细胞分化（Osteoclastogenesis）和骨吸收功能。其分子机制涉及降低活性氧（ROS）水平、抑制MAPK信号通路（包括ERK、JNK和p38磷酸化）以及下调NFATc1转录活性。动物实验证实SFC能有效改善卵巢切除（OVX）小鼠的骨密度与骨微结构，为骨质疏松治疗提供了新型候选药物。

　　

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Reagents and antibodies

SFC购自MedChemExpress公司（美国新泽西），实验室内使用DMSO溶解，动物实验采用玉米油作为溶剂。M-CSF与RANKL购自R&D Systems公司（美国明尼阿波利斯）。其他关键试剂包括4%多聚甲醛（PFA）、磷酸盐缓冲盐水（PBS）、Triton X-100、EDTA脱钙液、TBST缓冲液和DMSO均购自北京索莱宝科技有限公司。

siRNA转染

小鼠Nrf2基因特异性siRNA由广州锐博生物合成。在无血清条件下对BMMs进行转染，6小时后重新加入RANKL刺激并持续培养两天，该操作定期重复直至破骨细胞成熟。所用siRNA序列为：5′-CGACAGAC CCTCCATCTA-3′。

SFC抑制RANKL介导的破骨细胞生成

SFC的化学结构与分子式如图1A所示。CCK-8实验证实0-40 μM浓度范围内SFC对BMMs无细胞毒性（图1B）。通过TRAP染色发现，SFC以浓度依赖性方式抑制破骨细胞形成（0-20 μM），20 μM时抑制作用最为显著（图1C-D）。此外，骨吸收实验表明SFC显著降低破骨细胞的骨陷窝面积（图1E-F）。

讨论

绝经后骨质疏松（PMOP）的特征是雌激素缺乏导致的过度破骨细胞活性，进而增加病理性骨折风险。现有治疗药物如双磷酸盐类和地诺单抗存在严重副作用，亟需开发更安全的替代方案。本研究表明SFC通过激活Keap1/Nrf2通路增强抗氧化基因表达，降低ROS水平，进而抑制MAPK信号通路与NFATc1核转位。动物实验进一步验证SFC能有效维持OVX小鼠骨密度与骨微结构完整性，为其临床转化提供坚实依据。