电针通过雄性大鼠脊髓背角的KCC2/GABAAR通路参与疼痛传导过程

《Acupuncture and Herbal Medicine》：Electroacupuncture participates in pain transition through the KCC2/GABAAR pathway in the spinal dorsal horn of male rats

　　慢性疼痛从急性期向慢性期过渡的机制研究及电针干预效果分析。通过建立高反应性痛觉原型（HP）大鼠模型，结合脊髓背角（SCDH）中KCC2和GABAAR蛋白表达检测，发现电针刺激足三里（ST36）和昆仑（BL60）穴可显著提高痛阈，上调SCDH中KCC2和GABAAR表达水平。通过KCC2抑制剂阻断电针效应，证实电针通过激活KCC2-GABAAR通路抑制疼痛过渡。研究为针灸治疗慢性疼痛提供了新机制依据。

　　疼痛是人类健康中一个常见且重要的临床症状，被世界卫生组织（WHO）列为“第五生命体征”。近年来，随着对慢性疼痛的研究不断深入，慢性疼痛被正式列为独立疾病，出现在《国际疾病分类第十一版》（ICD-11）中。慢性疼痛不仅给患者带来严重的生理痛苦，还对生活质量产生深远影响，其治疗难度较大，主要由于其复杂的发病机制和现有药物的疗效有限。因此，探索新的治疗策略，如预防急性疼痛向慢性疼痛的转变（即疼痛过渡），成为当前疼痛研究的热点。

在神经系统中，γ-氨基丁酸受体A型（GABAAR）是一种重要的抑制性受体，参与疼痛的调节与传递。正常情况下，GABAAR的激活会导致神经元的超极化，从而发挥镇痛作用。然而，当GABAAR功能受损时，会减弱其抑制效果，进而导致神经元过度兴奋，促进疼痛的发生与持续。K⁺-Cl^?共转运体同工型2（KCC2）在维持神经元内氯离子浓度方面起着关键作用，其表达水平的变化会直接影响GABAAR的抑制功能。已有研究表明，KCC2的下调会导致氯离子外流减少，进而影响GABAAR的正常功能，最终引发疼痛过渡。

电针（EA）作为一种传统的中医治疗方法，近年来因其在治疗多种急慢性疼痛方面的良好效果而受到广泛关注。EA通常采用特定频率的电流刺激穴位，以达到调节神经活动的目的。研究表明，EA在慢性疼痛的治疗中具有显著的疗效，但其在急性疼痛向慢性疼痛过渡过程中的作用机制尚不明确。因此，本研究旨在探讨EA在预防疼痛过渡中的作用机制，特别是其对GABAAR和KCC2表达的影响。

为了模拟疼痛过渡的机制，本研究建立了由卡介苗（Car）和前列腺素E₂（PGE₂）诱导的疼痛过渡模型。通过在模型建立后连续三天进行鞘内注射GABAAR激动剂（muscimol）和KCC2激活剂（CLP257），研究它们对GABAAR和KCC2表达的影响。同时，EA在双侧足三里（ST36）和昆仑（BL60）穴位上进行干预，采用2/100 Hz的频率和特定的电流强度。通过von Frey细丝检测各组大鼠的疼痛阈值，结合Western blotting（WB）和免疫荧光（IF）技术，研究了GABAAR和KCC2在脊髓背角（SCDH）中的表达变化。

实验结果显示，与正常盐水（NS）+NS和NS+PGE₂组相比，Car+PGE₂组大鼠在PGE₂注射后48小时的疼痛阈值显著降低（P < 0.01），表明疼痛过渡模型成功建立。进一步的WB和IF结果显示，GABAAR和KCC2在SCDH中的表达在Car+PGE₂组显著下调（P < 0.01），而在NS+PGE₂组中没有显著变化（P > 0.05）。这表明GABAAR和KCC2的表达变化可能在疼痛过渡过程中起关键作用。

EA干预结果显示，与Car+PGE₂组相比，EA组大鼠在疼痛阈值方面表现出显著改善（P < 0.01），并且在SCDH中GABAAR和KCC2的表达显著上调（P < 0.05）。然而，当使用KCC2抑制剂VU0240551进行干预时，EA的镇痛效果被逆转，表明KCC2在EA调控疼痛过程中起着重要作用。

综上所述，本研究揭示了GABAAR和KCC2在疼痛过渡中的关键作用，并证实了EA通过上调这两种蛋白的表达，有效预防了疼痛过渡。这一发现不仅加深了对疼痛神经机制的理解，也为慢性疼痛的临床治疗提供了新的思路和潜在的治疗靶点。尽管研究取得了一定进展，但仍存在一些局限性，例如未深入探讨GABAAR和KCC2的具体细胞定位和结构分层，以及未结合电生理技术研究其功能变化。未来的研究可以进一步探讨其他氯离子通道是否参与了EA的镇痛作用，从而为疼痛治疗提供更全面的理论依据和实践方法。