纳米脂质体包裹的Gynura procumbens叶提取物通过增强抗氧化活性显著改善顺铂诱导的大鼠肝肾损伤

　　本研究创新性地采用纳米脂质体（LIP）包裹技术显著提升Gynura procumbens叶提取物（GLE）的生物利用度。实验证实LIP-GLE（粒径112±2.6 nm）在水和模拟胃液中的分散度分别提高6.6倍和4.6倍，能有效降低顺铂诱导的肝肾功能指标（ALT/AST/ALP/BUN/Cr），增强抗氧化酶（SOD/GSH）活性并降低氧化应激标志物（NO/AOPP），组织病理学进一步验证其肝肾保护作用。

　　

1 引言

药用植物在传统医学中始终占据重要地位，其中源自东南亚的长寿菜（Gynura procumbens）因其肝保护、抗炎、降压和降糖特性备受关注。尽管其提取物（GLE）具有多种药理活性，但存在水溶性差、胃肠稳定性低和口服吸收受限等问题。纳米药物递送系统特别是脂质体技术，凭借其生物相容性和保护活性成分的特性，为改善植物提取物的递送效率提供了新思路。

2 材料与方法

2.1 化学品与试剂

实验采用东京化工的磷脂酰胆碱和胆固醇，西格玛奥德里奇的西利马林和顺铂，所有试剂均为分析纯。

2.2 植物材料提取与鉴定

G. procumbens叶片采集自孟加拉国Natore地区，经国家植物标本馆鉴定（凭证号45273）。乙醇提取后通过旋转蒸发获得粗提物。

2.3 GC-MS成分分析

采用HP-5MS毛细管柱进行GC-MS分析，氦气载气流速1 mL/min，电子轰击离子源70 eV。通过NIST数据库比对鉴定化合物，主要成分包括n-十六烷酸（19.39%）、2-巯基丙酸（15.04%）和甲基2-羟基十七烷酸酯（14.72%）。

2.4 LIP-GLE制备

采用薄膜水化法制备纳米脂质体，GLE-卵磷脂与胆固醇按1:1比例溶解于乙醇，旋转蒸发形成薄膜后重悬于水，50°C超声30-40分钟获得乳绿色脂质体。

2.5 动态光散射分析

使用SZ-100纳米粒子分析仪测定粒径分布，LIP-GLE平均流体动力学直径为112±2.6 nm，PDI为0.231±0.04，zeta电位-16.1±3.1 mV，表明体系具有良好稳定性。

2.6 透射电镜观察

TEM图像显示脂质体呈规则球形结构，粒径分布与DLS结果一致。

2.7 FTIR相互作用分析

ATR-FTIR光谱显示GLE特征峰（1370 cm^-1和1167 cm^-1）在脂质体封装后发生展宽和位移，表明通过氢键和范德华力实现物理包封，未出现化学不相容现象。

2.8 体外分散研究

USP II型溶出度仪测试显示，LIP-GLE在水和0.1N HCl中的分散度分别达到76.7%和74.7%，显著高于GLE的11.7%和16.3%。

2.9 动物实验设计

雄性Wistar大鼠（250-300 g）随机分为5组：对照组（生理盐水）、疾病组（顺铂7.5 mg/kg ip）、标准组（顺铂+西利马林100 mg/kg po）、GLE组（顺铂+GLE 75 mg/kg po）和LIP-GLE组（顺铂+LIP-GLE 75 mg/kg po）。治疗10天后采集血清和组织样本。

2.10-2.13 生化与组织学分析

采用商用试剂盒检测血清ALT、AST、ALP、BUN和肌酐水平。组织匀浆检测NO、AOPP、SOD和GSH。肝肾组织经10%福尔马林固定，石蜡包埋后分别进行H&E和天狼星红染色。

3 结果与讨论

3.1 GC-MS研究

GLE中鉴定出9种主要化合物，其中n-十六烷酸具有已知的抗癌、肝保护和抗氧化活性，为后续药理作用提供物质基础。

3.2 LIP-GLE理化表征

纳米脂质体系统成功将提取物粒径控制在纳米级别，zeta电位表明体系具有良好胶体稳定性，TEM图像证实球形形态完整性。

3.3 体外分散性能

脂质体封装使提取物在两种介质中的分散度提高4-6倍，这种改善源于纳米颗粒的大比表面积和磷脂双分子层的亲水界面作用。

3.4 药物-聚合物相互作用

FTIR光谱证实GLE与脂质成分通过非共价相互作用实现封装，关键功能基团得以保留，确保生物活性完整性。

3.5 动物一般状况

顺铂组大鼠出现体重减轻、脱水和活动减少等毒性症状，治疗组特别是LIP-GLE组症状明显改善。

3.6 肝功能保护作用

LIP-GLE组ALT(39.9±2.13 U/L)、AST(44.1±3.26 U/L)和ALP(95.5±4.94 U/L)水平最接近对照组，显著优于GLE组，表明纳米系统能更有效稳定肝细胞膜。

3.7 肾功能改善效果

LIP-GLE使肌酐(1.32±0.17 mg/dL)和BUN(35.1±2.48 mg/dL)水平显著降低，其优越性归因于改善的溶解性和持续性释放特性。

3.8 氧化应激调控

在肝肾组织中，LIP-GLE显著降低NO和AOPP水平，表明能有效缓解顺铂引起的蛋白质氧化损伤。

3.9 抗氧化酶增强

LIP-GLE处理使SOD和GSH活性接近正常水平，证明纳米系统能增强内源性抗氧化防御体系。

3.10 肝组织病理学

H&E染色显示LIP-GLE组肝细胞索结构完整，中央静脉完好，天狼星红染色显示胶原沉积减少4.2倍，表明肝纤维化得到有效抑制。

3.11 肾组织病理学

LIP-GLE组肾小球和肾小管结构保持完整，炎症细胞浸润减少2.1倍，胶原积累下降1.8倍，证明显著的肾保护作用。

4 结论

纳米脂质体封装显著增强GLE的生物利用度和治疗效能。LIP-GLE通过改善提取物的分散性和稳定性，有效缓解顺铂引起的氧化应激和炎症反应，保持肝肾功能指标正常化，组织病理学证实其能有效保护肝肾组织结构完整性。该研究为植物提取物的纳米剂型开发提供重要参考。