AMPK-FOXO信号通路调控赤拟谷盗4EBP响应农药胁迫的转录机制及其在能量稳态中的关键作用

　　本研究揭示了赤拟谷盗（Tribolium castaneum）中4EBP（真核翻译起始因子4E结合蛋白）通过AMPK-FOXO信号通路响应溴氰菊酯胁迫的转录调控机制。该发现阐明了昆虫通过抑制能量密集型翻译过程（4EBP介导）以适应农药胁迫的生存策略，为害虫抗药性调控提供了新靶点（如TcAMPKα、TcFOXO、Tc4EBP）。

　　

^Highlight

^昆虫品系

赤拟谷盗Georgia-1（GA-1）品系按先前描述方法（Haliscak and Beeman, 1983）饲养于含5%酵母粉的面粉中，条件为30±1°C和40%相对湿度。

^{总RNA提取与逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）}

使用TRIzol?试剂（Vazyme, 南京）提取样本总RNA。以1μg RNA为模板，参照PrimeScript? RT试剂盒（TaKaRa, 大连）说明书合成cDNA。特异性引物见表1。

^{Tc4EBP的克隆与序列分析}

通过RT-PCR克隆获得Tc4EBP全长编码序列（GenBank登录号PV640424），该序列长354核苷酸，编码117个氨基酸，预测分子量为12.8 kDa，等电点为9.48（图1A）。序列分析显示Tc4EBP包含典型RAIP基序、保守eIF4E结合域Y(X)₄L?及TOS位点，并具有4个预测磷酸化位点（图1B）。多重序列比对表明Tc4EBP...

^讨论

4EBP是后生动物整体翻译水平的重要调控因子。尽管哺乳动物和果蝇的4EBP直系同源物已被广泛研究，但害虫中的4EBP特征仍不清楚。本研究从赤拟谷盗中鉴定并表征了Tc4EBP。与果蝇d4EBP类似，Tc4EBP包含常见的eIF4E结合基序⁵⁴YXXXXL?⁶⁰（X为任意氨基酸，?为疏水氨基酸），该基序通过与eIF4G竞争结合eIF4E，以及C末端的TOS基序...