HDAC2通过RBM47/NONO信号轴促进髓母细胞瘤恶性进展的机制研究

　　本研究针对髓母细胞瘤(MB)治疗中HDAC2的作用机制不明确的问题，开展了HDAC2/RBM47/NONO信号轴调控MB恶性进展的研究。发现HDAC2通过H3K27去乙酰化促进RBM47表达，RBM47与NONO相互作用稳定蛋白表达，共同激活PI3K-AKT通路，从而促进MB细胞增殖、迁移和侵袭。敲低HDAC2可增强MB细胞对替莫唑胺(TMZ)的敏感性，为MB靶向治疗提供了新策略。

　　

在儿童恶性脑肿瘤中，髓母细胞瘤(Medulloblastoma, MB)约占20%，其中Group3亚型因常伴有MYC扩增而预后最差。虽然组蛋白乙酰化修饰在肿瘤发生发展中起关键作用，但HDAC2在MB中的具体机制仍不明确。同时，RNA结合蛋白RBM47和NONO在肿瘤中的作用日益受到关注，它们是否参与HDAC2介导的MB恶性进展尚不清楚。

为阐明HDAC2在MB中的作用机制，研究人员通过多组学分析、分子生物学实验和动物模型，系统研究了HDAC2/RBM47/NONO轴在MB恶性进展中的功能。研究发现发表于《Translational Oncology》。

研究主要采用以下关键技术方法：1)利用GEO、TCGA等公共数据库进行生物信息学分析；2)通过慢病毒介导的RNA干扰技术敲低基因表达；3)采用MTT、EdU、Transwell等技术检测细胞增殖、迁移和侵袭能力；4)建立细胞系来源异种移植(CDX)模型进行体内验证；5)运用染色质免疫沉淀(CHIP)、双荧光素酶报告基因等技术研究转录调控机制；6)通过Co-IP、蛋白稳定性实验等研究蛋白相互作用。

Poor prognosis in MB patients associated with high expression of HDAC2

通过分析GSE164677数据集发现，与正常组织相比，MB肿瘤组织中HDAC1和HDAC2表达显著升高，且只有HDAC2高表达与患者不良预后相关。数据库分析显示HDAC2在多种癌症中过表达，且在3岁以下儿童中表达更高。

HDAC2 promotes the proliferation, migration and invasion of MB cells

在DAOY和ONS76细胞中敲低HDAC2后，细胞增殖、迁移和侵袭能力显著抑制。体内实验表明，敲低HDAC2可减小肿瘤体积和重量，延长小鼠生存期。机制上，HDAC2敲低导致G1期细胞周期阻滞，CDK4、CDK6和CCND1蛋白表达下降，上皮-间质转化(EMT)进程受阻。

HDAC2 promotes RBM47 expression though H3K27 deacetylation in MB cells

GO和GSEA分析显示HDAC2参与RNA相关过程。实验证实HDAC2与RBM47表达呈正相关，且HDAC2通过结合RBM47启动子区域并介导H3K27去乙酰化来促进RBM47转录表达。

RBM47 promotes the proliferation, migration and invasion of MB cells

敲低RBM47可抑制MB细胞增殖、迁移和侵袭，而过表达RBM47则促进这些恶性表型。回复实验证明RBM47能挽救HDAC2敲低导致的表型抑制。

RBM47 interacts with NONO to promote the phenotype of MB cells

RBM47与NONO存在直接相互作用，共定位于细胞核。NONO的RRM1/2结构域是结合RBM47所必需的。RBM47通过抑制泛素-蛋白酶体降解途径来稳定NONO蛋白表达。

The HDAC2/RBM47/NONO axis regulates P13K-AKT signaling

回复实验表明，同时恢复HDAC2和RBM47表达可挽救MB细胞的恶性表型。该信号轴通过调控PTEN和p-AKT表达影响PI3K-AKT信号通路活性。

Downregulation of HDAC2 enhances the sensitivity of MB cells to temozolomide (TMZ)

敲低HDAC2可降低MB细胞对TMZ的IC₅₀值，增加细胞凋亡率。Western blot显示凋亡相关蛋白Bcl2和BAX减少，Cleaved PARP增加。体内实验进一步证实敲低HDAC2可增强TMZ的治疗效果。

研究表明，HDAC2在MB中通过去乙酰化修饰促进RBM47转录表达，RBM47与NONO相互作用并稳定其蛋白表达，三者形成正反馈调节轴，共同激活PI3K-AKT信号通路，从而促进MB细胞增殖、迁移和侵袭。靶向HDAC2不仅能抑制MB恶性进展，还能增强TMZ化疗敏感性，这为MB治疗提供了新的潜在靶点和联合治疗策略。该研究首次揭示了HDAC2/RBM47/NONO轴在MB中的重要作用，为理解MB表观遗传调控机制提供了新视角。