治疗性siRNA与ASO的转化与临床开发：行业实践、观点与建议

　　本刊推荐：针对RNA疗法开发标准缺失的问题，IQ联盟核酸工作组开展治疗性siRNA与ASO行业实践研究，系统总结了生物偶联、生物分析、生物转化、组织分布、计算模型及临床药理学六大关键领域的最佳实践，提出了基于化学平台特性的简化研究策略，为加速这类靶向"不可成药"蛋白的新型疗法开发提供了重要指导。

　　

在精准医疗时代，RNA疗法特别是小干扰RNA(siRNA)和反义寡核苷酸(ASOs)代表了一类革命性的治疗方式，能够靶向传统小分子药物难以触及的"不可成药"蛋白。然而，这类新型疗法的开发面临诸多挑战：缺乏统一的行业标准、监管指南尚不完善、且其独特的药代动力学特性使得传统小分子药物的开发策略往往不再适用。正是为了解决这些关键问题，由诺和诺德、百时美施贵宝、礼来等25家跨国药企专家组成的IQ联盟核酸工作组，在《Nucleic Acids Research》上发表了这份行业白皮书，系统总结了治疗性siRNA和ASO开发过程中的行业实践与建议。

研究人员通过系统梳理已获批 oligonucleotide 疗法的开发经验，围绕六个核心领域展开了深入分析。他们采用的方法包括对现有监管申报资料的回顾分析、行业专家共识形成、以及基于化学平台特性的分类评估方法。特别值得关注的是，工作组对FDA和EMA已批准的17种寡核苷酸药物的申报资料进行了全面分析，涵盖了生物分析平台选择、生物转化研究策略、组织分布研究要求等关键方面。

在生物偶联领域，研究表明显著的靶向递送策略如GalNAc(N-乙酰半乳糖胺)偶联已成功用于肝靶向治疗，抗体-寡核苷酸偶联物(AOCs)则正在探索用于肿瘤靶向。研究人员指出，虽然偶联策略显著改善了递送效率，但需要确保修饰不会影响靶标特异性或引入意外的免疫原性。

生物分析方面，研究比较了液质联用(LC-MS)、配体结合试验(LBA)和茎环RT-qPCR(SL RT-qPCR)三种主要平台的优缺点。LC-MS具有高特异性但灵敏度相对较低，LBA和PCR方法灵敏度高但特异性较低。工作组建议根据开发阶段、灵敏度要求和代谢特性选择合适的平台，并保持平台一致性以减少数据变异。

生物转化研究显示，寡核苷酸主要通过内切酶和外切酶代谢，与物种间具有较高相似性。对于已确立的化学平台(如GalNAc-siRNA)，活性代谢物AS(n-1)3'通常保持药理活性，而更短的代谢物活性逐渐降低。工作组建议采用基于体外模型的研究策略，遵循3R原则减少动物使用。

组织分布研究表明，系统给药的寡核苷酸主要积累在肝脏和肾脏。对于具有已确立化学平台的分子，只需在有限组织(≤2个)中通过非放射性生物分析方法确认暴露即可。而对于包含新型成分的分子，则需要更全面的组织采样方案。

计算建模与仿真部分显示，基于生理的药代动力学(PBPK)建模和药效学(PD)建模对于理解组织PK-PD关系至关重要。由于寡核苷酸在组织中的半衰期较长(数天至数周)，而血浆半衰期较短(数小时)，传统的血浆PK-PD关系往往不适用，需要建立机制性模型来桥接这一差距。

临床药理学评估表明，寡核苷酸导致QTc延长的风险非常低，药物-药物相互作用(DDI)的可能性也较小。对于肝肾损伤患者，通常不需要调整剂量，因为暴露量变化与药效学结果之间缺乏相关性。

本研究最重要的发现是提出了基于"类别规则"的开发策略。研究人员将寡核苷酸分为两类：已有监管先例的化学平台和包含新型成分的平台。对于前者，可以采用简化的研究策略；而对于后者，则需要更全面的评估。这一分类方法为行业提供了明确的技术路线图，能够显著提高开发效率。

研究结论强调，虽然监管指南已开始出现，但在许多方面仍缺乏详细和一致的指导。这份白皮书通过整合行业见解，填补了当前指南中的关键空白，特别是在生物分析方法、生物转化评估和组织分布研究方面。工作组的建议旨在为监管机构提供参考，促进更统一的审评标准，最终加速这些创新疗法惠及患者。

该研究的重大意义在于为RNA疗法的开发建立了首个行业共识框架，不仅适用于当前已批准的分子，也为未来新型寡核苷酸药物的开发指明了方向。随着更多数据积累和案例研究，这些建议将进一步完善，最终推动整个领域向更加标准化、高效化的方向发展。