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  • 综述:壳聚糖基材料用于致病菌荧光与比色检测的综合评述(2011–2025)

    核酸侧向层析检测技术概述核酸侧向层析检测(Nucleic Acid Lateral Flow Assay, NALFA)作为一种快速、低成本的分子诊断工具,近年来在病原体核酸检测领域展现出显著优势。与传统依赖抗体-抗原相互作用的免疫层析技术不同,NALFA通过寡核苷酸探针实现特异性核酸识别,兼具操作简便性与高灵敏度特性。该系统通过侧向层析膜上固定探针与目标核酸的杂交反应,结合纳米粒子标记技术(如金纳米颗粒、量子点),实现可视化检测结果输出。核心检测策略与技术突破当前NALFA系统主要采用三类检测模式:基于杂交链反应(HCR)的信号放大体系、CRISPR/Cas12a/13a介导的核酸剪切技术,

    来源:Critical Reviews in Analytical Chemistry

    时间:2025-10-11

  • 综述:基于CRISPR的平台在临床样本中检测肿瘤相关遗传物质

    ABSTRACT肿瘤相关遗传标志物在癌症早期筛查、诊断和治疗监测中具有重要价值。然而传统检测方法存在操作流程复杂、耗时较长且设备成本高昂的局限性。CRISPR/Cas系统凭借其可编程性(programmability)、快速反应特性、高靶向特异性以及信号放大能力,正成为肿瘤检测领域新兴的重要工具。该技术已在基因突变、DNA甲基化(DNA methylation)、微小核糖核酸(miRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)和环状RNA(circRNA)等肿瘤相关遗传物质的检测方面取得突破性进展。本文系统评述了这些技术突破,并阐述了各CRISPR/Cas系统检测肿瘤相关遗传物质的核心机制,同时强

    来源:Bioanalysis

    时间:2025-10-11

  • 斑马鱼LOXHD1b基因敲除揭示其调控毛细胞神经活动与游泳行为的关键作用

    由于人类内耳毛细胞不具备再生能力,目前对遗传性耳聋的治疗主要依赖助听器或人工耳蜗植入。然而,揭示遗传性听力损失相关基因的功能不仅有助于诊断,对疗法开发也具有重要意义。由LOXHD1突变引起的人类非综合征型耳聋DFNB77虽不伴随内耳形态缺陷,但其致病机制尚未完全阐明。研究人员选用斑马鱼作为模型,因其侧线毛细胞在结构与功能上与人内耳毛细胞高度相似,且可通过游泳行为评估与非症状性听力损失相关的突变。利用CRISPR-Cas9系统,研究团队成功构建了在侧线毛细胞中表达的LOXHD1b基因敲除(KO)斑马鱼,并对其形态和功能变化进行了系统评估。与人类患者相似,LOXHD1b KO斑马鱼幼体未表现出可检

    来源:Cell and Tissue Research

    时间:2025-10-11

  • 胞质内精子注射(ICSI)介导的转基因禽类生物反应器开发策略及其应用前景

    Section snippetsIntegration of foreign genes into the host chromosome外源基因在宿主染色体中的整合为创建转基因动物,必须将外源基因导入宿主细胞DNA中。动物细胞中的外源基因整合系统分为随机整合和基因靶向整合。在随机整合中,源自逆转录病毒或慢病毒的基因转移载体是最强大可靠的工具,可稳定整合治疗性转基因于哺乳动物和禽类细胞中。逆转录病毒和慢病毒的反转录...Current strategy for the production of transgenic birds当前转基因禽类的生产策略在哺乳动物中,可靠的胚胎干细胞和诱导多能干

    来源:Protein Expression and Purification

    时间:2025-10-11

  • CRISPR/Cas与LAMP联用技术:田间快速检测Digitaria ciliaris var. chrysoblephara杂合除草剂抗性的新方法

    背景:马唐属植物Digitaria ciliaris var. chrysoblephara对乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)抑制剂类除草剂cyhalofop-butyl的抗性主要由W2027C或W2027S位点突变引起,但现有检测方法性能不足且难以实现田间集成化检测。结果:研究人员开发了基于CRISPR/Cas系统与环介导等温扩增(LAMP)技术联用的OpCas-LAMP一锅法检测体系。通过特异性CRISPR/Cas向导RNA(gRNA)和LAMP引物设计,该方法可精准识别1%杂合突变水平的W2027S/C突变,在65°C条件下经30分钟CRISPR/Cas预切割和30分钟LAMP扩增,即可

    来源:Pest Management Science

    时间:2025-10-11

  • 综述:花生整合基因组学与遗传学:从进化洞察到精准育种

    Abstract花生(Arachis hypogaea L.)作为全球重要的油料作物,正面临着日益增长的食用油需求以及生物和非生物胁迫的挑战。这篇综述综合了近年来在花生基因组学、进化生物学和育种技术方面的最新进展,旨在应对这些挑战,以提高产量、油脂品质和抗逆性。进化起源与基因组特征栽培花生是一个异源四倍体(AABB),由二倍体祖先A. duranensis和A. ipaensis杂交后经历多倍化形成。然而,不同的进化模型突显了其驯化历史中尚未解决的方面。测序技术的进步使得栽培花生的高质量基因组组装成为可能,这促进了分子标记(如SSRs、SNPs)的开发、性状解析以及跨组学整合。基因组学研究揭示

    来源:Functional & Integrative Genomics

    时间:2025-10-11

  • CRISPR/Cas9介导斑马鱼Toll样受体5a(tlr5a)基因敲除增强对杀鲇爱德华菌抗性的研究

    亮点本研究首次通过CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术,在斑马鱼模型中成功敲除tlr5a基因,系统阐明了该受体在杀鲇爱德华菌(Edwardsiella piscicida)感染过程中的双重调控作用。有趣的是,tlr5a−/−突变体反而表现出更强的细菌清除能力和生存优势,其机制与NF-κB(核因子κB)通路活性的精细调控密切相关。tlr5a的计算机模拟分析与人类TLR5的氨基酸序列对比显示,斑马鱼Tlr5a包含信号肽、富含亮氨酸重复序列(LRR)、LRR_C末端结构域(LRR_CT)、跨膜区(TM)以及Toll/白介素-1受体(TIR)结构域(图1、2)。多重序列分析揭示,TIR结构域在不同

    来源:Fish & Shellfish Immunology

    时间:2025-10-11

  • CRISPR/Cas9介导GDF9基因编辑对山羊颗粒细胞受体信号及FGF2应答的调控机制研究

    通过CRISPR/Cas9基因编辑技术(包含单向导RNAsgRNA和Cas9内切酶)特异性敲除山羊颗粒细胞中的GDF9基因,经T7内切酶IT7E1验证敲除成功后,发现GDF9缺失显著影响其受体BMPR-1A、BMPR-1B和BMPR-II的表达水平。在野生型细胞中,成纤维细胞生长因子2FGF2可上调BMPR-1A/B/II的mRNA表达,同时促进卵泡刺激素受体FSHR表达而抑制黄体生成素受体LHR;但GDF9敲除细胞中FSHR和LHR表达均升高。GDF9与FGF2协同增强类固醇生成关键基因StAR的表达,并下调凋亡标志物CASPASE 3、上调增殖标志物PCNA。该研究揭示了GDF9通过调控受

    来源:Reproduction in Domestic Animals

    时间:2025-10-11

  • 综述:利用节段培养技术实现难再生园艺作物的高效再生及CRISPR/Cas基因组编辑

    引言难再生作物,其种子通常具有高含水量(30-70%),对低温敏感,种子活力极易在短期内丧失,这给其繁殖和遗传改良带来了巨大挑战。传统的组织培养方法在这些作物中往往效率低下。节段培养技术利用其节间和顶端分生组织细胞分裂旺盛、全能性高的特点,且含水量相对较低,为解决难再生作物的脱水和微生物污染等问题提供了有效途径。节段培养方案及其在难再生园艺作物中的反应节段培养方案涉及使用无菌的未成熟节段作为外植体。外植体经过清洁剂(如Tween 20)和消毒剂(如羧苯并咪唑、链霉素、乙醇、次氯酸钠)的严格表面消毒后,接种到添加了精确配比生长调节剂(主要是生长素和细胞分裂素)的培养基(如MS、WPM、DKW)中

    来源:Horticulture Advances

    时间:2025-10-11

  • 可诱导CRISPR–Cas9筛选平台在非增殖细胞状态研究中的创新应用

    科学家们开发出一项突破性技术——可诱导CRISPR–Cas9(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats–CRISPR associated protein 9)筛选平台,专门用于探索非增殖性细胞状态的神秘面纱。传统CRISPR筛选虽然在增殖细胞中效果显著,但当面对分裂停滞的细胞时,其编辑效率骤降,难以准确捕捉引导RNA(guide RNA)的"脱落"信号。这项创新方案通过引入可诱导型Cas9系统,实现了对Cas9蛋白表达的精准时序控制。这意味着基因编辑只在目标细胞完全进入非增殖状态(如细胞衰老、分化或静息)后才会启动,有

    来源:Nature Protocols

    时间:2025-10-10

  • 二硫化钼通过直接结合并调控MST2活性诱导肝细胞生长抑制及自噬依赖性死亡

    随着纳米材料在生物医学领域的广泛应用,二硫化钼(MoS2)因其独特的光热转换性能和载药能力成为研究热点。然而,这种二维片状纳米材料进入体内后会在肝脏显著富集,其潜在的肝毒性机制却尚未明确。既往研究虽观察到MoS2可引起线粒体功能损伤和炎症反应,但对其分子靶点和信号通路的认知仍存在空白,这严重制约了其临床转化应用。为系统解析MoS2的肝毒性机制,山东第一医科大学附属省立医院胃肠外科的高明团队在《Materials Today Bio》发表了突破性研究成果。研究人员通过综合运用全基因组CRISPR-Cas9筛选、分子动力学模拟、蛋白质质谱分析等前沿技术,结合体内外模型验证,首次揭示MoS2通过直接

    来源:Materials Today Bio

    时间:2025-10-10

  • 综述:植物染色质与转录组工程的调控策略、挑战与展望

    引言植物通过调控染色质可及性实现对转录组的精密控制,这一过程依赖于对DNA和组蛋白的化学修饰。染色质由约146bp的DNA缠绕组蛋白八聚体形成核心核小体单元,其修饰包括DNA甲基化、组蛋白变体替换以及组蛋白尾部的翻译后修饰(PTMs),如乙酰化(ac)、甲基化(me)和磷酸化等。这些表观遗传标记(如H3K9ac、H3K27me3)能够动态调节基因表达,而不改变DNA序列本身,从而在植物发育和环境响应中发挥关键作用。例如,拟南芥的春化过程通过调控FLOWERING LOCUS C(FLC)基因位点的组蛋白修饰状态(从激活态的H2A.Z、H3K4me3转变为抑制态的H3K27me3)精确控制开花时

    来源:Current Opinion in Plant Biology

    时间:2025-10-10

  • 黄瓜收获前穗发芽主效QTL qPHS4.1精细定位与关键基因CsDOG1的功能解析

    引言黄瓜(Cucumis sativus L.)作为全球广泛种植的重要经济作物,其种子质量直接影响农业生产效益。收获前穗发芽(Pre-harvest sprouting, PHS)是指种子在母体果实内提前萌发的现象,严重降低种子活力和商业价值。PHS与种子休眠存在动态关联,高休眠性可维持种子休眠状态直至适宜萌发条件,而低休眠性则导致PHS敏感。尽管在拟南芥、水稻和小麦等作物中已克隆多个PHS相关基因,但黄瓜PHS的遗传机制尚未明确。前期研究通过QTL定位在黄瓜4号染色体发现主效QTL qPHS4.1,但其候选基因和分子机制仍需深入解析。材料与方法研究选用高感PHS自交系P60和高抗自交系Q12

    来源:Frontiers in Plant Science

    时间:2025-10-10

  • 基于pCAMBIA2300的新型重组CRISPR/Cas9载体系统助力植物高效基因组编辑

    研究人员开发了一种基于pCAMBIA2300的新型重组CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)/Cas9(CRISPR-associated protein 9)载体系统(简称pCR),旨在解决植物基因组编辑效率低下的难题。该系统对Cas9互补DNA(cDNA)进行了多重优化:在N端和C端添加核定位信号(Nuclear Localization Signals)并进行密码子优化;移除内部限制性酶切位点;在5'端引入马铃薯Rubisco小亚基(rbcS)5'非翻译区(UTR)序列,该序列嵌入马铃薯颗粒结合淀

    来源:Transgenic Research

    时间:2025-10-10

  • ALG1通过调控N-连接糖基化与内质网应激促进肺腺癌侵袭性表型的作用机制研究

    糖基化在多种生物学过程中扮演关键角色,对细胞存活至关重要。异常糖基化与包括癌症在内的多种疾病密切相关。肺癌仍是全球癌症相关死亡的主要原因。既往研究已证实肺癌进展与异常糖基化存在关联。天冬酰胺连接糖基化蛋白1(ALG1)是N-连接糖基化过程中的关键酶,但其在癌症进展中的作用尚未明确。本研究通过分析癌症基因组图谱(TCGA)数据发现,ALG1在肺肿瘤组织中表达显著上调,且与患者不良预后相关。为探究其功能,研究人员采用CRISPR-Cas9介导的基因敲除技术,在A549肺腺癌细胞中耗尽ALG1表达。ALG1缺失导致蛋白质N-连接糖基化水平降低,并诱发内质网应激(ER-stress)响应。表型实验与分

    来源:Glycoconjugate Journal

    时间:2025-10-10

  • 综述:同种异体嵌合抗原受体T细胞治疗血液系统恶性肿瘤的机制与临床进展

    引言嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法已成为治疗血液系统恶性肿瘤的一种变革性策略。目前全球已有多种CAR-T产品获批,其中七种获得美国食品药品监督管理局(FDA)批准。自体CAR-T(auto-CAR-T)细胞疗法虽显示出显著疗效,但其存在诸多缺点,包括需要采集患者自身的T淋巴细胞、流程复杂、制备时间长、从经过多重治疗的患者体内采集的常常是耗竭细胞导致数量不足、T细胞质量可能不符合FDA规格以及成本高昂,这些都限制了其广泛应用。同种异体CAR-T(allo-CAR-T)疗法提供了一种前景广阔的替代方案,具有多重优势,例如可作为“现货”产品立即使用、生产标准化符合预定质量标准以及可能降低成本。

    来源:Transplantation and Cellular Therapy

    时间:2025-10-10

  • 延长保存牛卵巢来源合子CRISPR Cas9-RNP电穿孔基因组编辑的可行性及条件优化研究

    随着CRISPR-Cas9技术的迅速发展,其在哺乳动物基因组精准编辑中的应用日益广泛,特别是在畜牧育种和生物医学研究中展现出巨大潜力。然而,该技术在牛等大动物胚胎中的应用仍面临两大挑战:一是传统体外受精(IVF)流程中,合子电穿孔的最佳操作时间多集中在午夜至凌晨,极大增加了实验操作的难度和人员负担;二是CRISPR-Cas9介导的编辑在合子阶段容易导致嵌合体(mosaicism)现象,即同一胚胎中同时存在编辑和未编辑的细胞,严重影响基因敲除(KO)的效率和后续动物模型的建立。为解决上述问题,研究人员探索利用延长保存的屠宰场来源牛卵巢,以灵活安排实验时间,并系统优化电穿孔参数,旨在提高编辑效率、

    来源:Theriogenology

    时间:2025-10-10

  • 综述:从遗传限制到工艺障碍:对Kluyveromyces marxianus在食品工业中高效生物制造和生物加工应用的综述

    Kluyveromyces marxianus,一种广泛应用于生物制造的微生物平台,因其独特的内在特性展现出巨大的应用潜力。近年来,该酵母在利用木质纤维素生物质、异源蛋白生产以及风味和香料分子合成方面得到了显著发展。然而,关于其在食品工业中的最新应用综述已超过五年,这在一定程度上限制了其在该领域的快速推广。本文旨在系统总结K. marxianus的生理特性及其潜在的工业应用,重点分析高细胞密度发酵过程中的关键限制因素,并提出一种综合策略,结合动态补料、代谢通路工程以及发酵参数优化,以推动其在食品工业中的高效制造与应用。K. marxianus作为微生物细胞工厂,具有多个显著优势。首先,它能够在

    来源:Current Research in Food Science

    时间:2025-10-10

  • 可编程crRNA变体工具箱:实现Cas12a功能灵活调控的新策略

    CRISPR-Cas技术彻底改变了我们探索和修饰生物系统的方式,为核酸的快速识别、编辑和操作提供了强大工具。其中,Cas12a作为广泛研究的II类/V型CRISPR-Cas核酸酶,在crRNA引导下以序列特异性方式结合并切割双链DNA(dsDNA),这一过程称为顺式切割,随后激活反式切割活性,使Cas12a能够非特异性地切割周围单链DNA(ssDNA)。Cas12a具有T富集靶向、高特异性、短crRNA易于加工合成以及特征性反式切割活性等特点,使其在基因编辑和核酸诊断领域得到广泛应用。然而,目前缺乏一种兼具灵活性和简便性的活性调控策略,使Cas12a能够适应不同应用场景的多样化需求。现有的策略

    来源:Nature Communications

    时间:2025-10-09

  • CRISPR-MI与scRNA测序揭示TREM2在腹主动脉瘤形成过程中调控单核细胞浸润和巨噬细胞凋亡的双重功能

    1 引言腹主动脉瘤(Abdominal Aortic Aneurysm, AAA)是一种危及生命的主动脉疾病,其特征是腹主动脉局部扩张(直径>3 cm或超过正常50%)。作为仅次于动脉粥样硬化的第二大主动脉疾病,AAA在75-84岁人群中的患病率高达12.5%,是全球第九大死亡原因。当前AAA治疗主要依赖开放性手术或血管内动脉瘤修复,缺乏有效药物治疗方案。单核细胞向主动脉壁的浸润是AAA发展的关键环节。这一多步骤过程包括:选择素介导的初始栓系和滚动(L-选择素、P-选择素、E-选择素)、整合素激活介导的稳固黏附(LFA1-ICAM1、VLA4-VCAM1),以及通过连接粘附分子(JAM家族、P

    来源:Advanced Science

    时间:2025-10-09


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